干旱胁迫对植物生理生化指标的影响解说.docVIP

2014-2015学年上学期 植物生理学实验科技论文 　 题　　目 干旱胁迫对小麦生理生活指标的影响 姓　　名 　　　 张蓉娜　 　 学　　号 　　　 124120249 　 　　 院、　系 　 生命科学学院应用生物教育 　 专　　业 　　 12 应用生物教育A班 任课教师 李忠光（教授） 二0一四年十二月 干旱胁迫对小麦生理生化指标的影响 12应用生物教育A班 张蓉娜 124120249 摘要：干旱胁迫是影响小麦产量的重要胁迫因素，而干旱胁迫对小麦生理生化指标有显著影响。通过对干旱胁迫下的小麦幼苗与正常小麦幼苗中的脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、还原型谷胱甘肽(GSH)的提取与含量测定分析，实验结果表明：干旱胁迫下的小麦幼苗的脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量均比正常小麦幼苗的含量高，证明干旱胁迫对小麦生理生化指标有影响。 关键词：干旱胁迫、小麦、生理指标引言：目前全球干旱、半干旱地区约占土地总面积的36％,占耕地面积的43％，大多数国家都面临水资源危机，我国也不例外[1]。干旱在我国分布广泛，一年四季均有可能发生，对农业生产影响十分严重。小麦是世界上仅次于玉米的第二大粮食作物，世界上约有70％的小麦播种面积分布在干旱、半干旱农业区[2]。如果干旱发生在小麦开花期或者灌浆期，就会导致其灌浆期减短、产量严重减少[3]。其在生长过程中，经常会受到干旱的影响，在世界范围内，由于水分所造成的减产，可能要超过其他因素所导致的产量损失总和[4]。由于环境污染导致可利用水资源大大减少，干旱现象日益严重。因此，研究干旱胁迫对小麦的生理生化指标的影响，提高小麦的抗旱性能、提高小麦产量具有重要意义。 1材料与方法： 1.1实验材料：小麦种子和玉米种子 1.1.1材料处理： 小麦和玉米种子吸胀12h后即可用于测定种子发芽率的实验。 选取长势一致的小麦幼苗做干旱5天处理。 干旱胁迫下处理的小麦幼苗为实验组，正常培养的小麦幼苗为对照组。1.1.2实验试剂： TTC、曙红染液、0.1% HgCl、蒸馏水、3% 磺基水杨酸（SSA)、石英砂、冰乙酸、茚三酮、0.1% TCA、0.5% TBA、20% 三氯乙酸（TCA）、0.3% TCA [用20% TC配制]、0.1 %Ti(SO4)2[用20%（v/v)H2SO4配制]、50 mmol/L PBS(PH=6.0，内含0.1 mmol/L EDTA，1%PVP)、POD反应混合液（10 mmol/L愈创木酚，5 mmol/L H2O2,用PBS溶解）、 PPO反应混合液（ 20 mmol/L邻苯二酚，用PBS溶解）、3% 三氯乙酸（TCA）、1M NaOH 、2 mM DTNB、5%三氯乙酸（TCA）、0.15 M NaH2PO4 (pH=7.4)、44%磷酸和4%联吡啶、3%FeCl3、1.1.3实验仪器： 研钵、试管、电子天平、移液管、洗耳球、722型分光光度计、离心机、微量加样器、恒温水浴锅。 1.2实验方法： 1.2.1种子发芽率的测定： 各取50粒吸胀的玉米种子或小麦种子，沿胚的中心线切成两半（严格区分两个半粒），进行下列实验：其中50个半粒进行TTC染色（30℃水浴 20min）；另50个半粒进行曙红染色（室温染色10 min），洗净后观察。根据两种方法的染色情况，分别计算发芽率。 1.2.2脯氨酸（Pro）含量的测定： 提取：分别取0.1 g实验组和对照组的幼苗→加入3 mL 3%磺基水杨酸（SSA）和少许石英砂→充分研磨→用2 mL 3% SSA洗研钵→ 5000rpm离心10 min →量上清液体积。 测定：上清液各2 mL →分别加入 2 mL冰乙酸和2 mL茚三酮试剂→煮沸15 min→冷却后→5000 rpm离心10 min（若没沉淀可略此步骤） →分别测定A520。 计算： 1.2.3丙二醛（MDA）含量的测定： 提取：分别取0.1 g实验组和对照组→加入3 mL 0.1% TCA 和少许石英砂→充分研磨→用2 mL 0.1%TCA洗研钵→5000 rpm离心10 min →量上清液体积。 测定：分别取上清液各1 mL →加入0.5%TBA（用20%TCA配制） 3 mL→煮沸15 min→冷却后→5000 rpm离心5 min （视沉淀有无）→分别测定OD450和OD532。 计算： OD450=C1×85.4 OD532= C1×7.4+155000×C2 求