梅毒螺旋体抗体的剖析.pptVIP

梅毒螺旋体抗体的检测原理和临床意义 裴娟 问题及概述 实验室检测注意事项及临床意义 ? 梅毒实验室检测策略探讨 问题-1 下列哪些说法是错的？ ① 一旦感染梅毒，TPPA常终身阳性 ② TPPA可用于疗效判断 ③梅毒孕妇所生婴儿RPR和TPPA检测结果阳性 可诊断为胎传梅毒 ④ RPR只能用于梅毒初筛 问题-1（续） 下列哪些说法是错的？ ⑤ ELISA法不能用于初筛 ⑥核酸检测方法可以用于梅毒的血液标本检测 ⑦二期梅毒时，TPPA和RPR两种血清学试验敏感性均 可达100％ 问题-2 开展RPR/TRUST试验时应采用下面哪种仪器或方法进行抗原抗体凝集反应： ① 水平旋转仪 ② 振荡器 ③手工水平摇动 ④混悬器 问题-3 下列描述正确吗？ “TRUST法对早期、晚期梅毒检测的敏感性低及治疗后梅毒不敏感。 例如一组272例抗-TP确认阳性样本，而其只检测到105例，敏感性为 38.2%” ” ，这样的说法对吗？ 梅毒概述 梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种慢性、系统性的全身性传播疾病。人受感染后，螺旋体很快传播全身，几乎可以侵犯全身各个组织和器官，临床表现多样，且时显时隐，病程较长。 梅毒概述 梅毒病人是唯一的传染源。性接触传染占95%。主要通过性交由破损处传染，梅毒螺旋体大量存在于皮肤粘膜损害表面，也见于唾液、乳汁、精液、尿液、阴道分泌物。梅毒孕妇可通过胎盘使胎儿在宫内感染或出生时接触母亲有病损的产道受染。 未经治疗的病人在感染一年内最具传染性，随病期延长，传染性越来越小，病期超过4年者，通过性接触无传染性。 梅毒概述 临床上分三期： Ⅰ期（初期）梅毒：感染后3周左右局部出现无痛性硬下疳。4-8周后，硬下疳自愈。 Ⅱ期（中期）梅毒：发生于硬下疳出现后2-8周。 Ⅲ期（晚期）梅毒：发生于感染后2年后，亦可长达10-15年。 Ⅰ 、Ⅱ期传染性强，但破坏性较小。 Ⅲ期螺旋体少但破坏性大，若侵害中枢神经系统和心血管，可危及生命。 梅毒概述 螺旋体抵抗力极弱，对温度和干燥特别敏感，离体后在干燥环境中1-2小时即死亡，在50℃5分钟死亡，在4 ℃置3天后可死亡，因此4℃血库存放3天以上的血液无传染梅毒的危险。对常用化学消毒剂亦敏感。 梅毒是一个可以治愈的传染病 病史 症状 实验室依据 实验室检查结果对梅毒诊断及判愈有决定性意义 ！ 常用实验室检查方法 病原学方法 血清学方法 病原学检测 原理：一期、二期梅毒时，取硬下疳、扁平湿 疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得 到的组织液，在暗视野显微镜下，光线从聚光器 的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光， 从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。 方法： （1）暗视显微镜检查 （2）镀银染色法 （3）核酸检测（血液标本？） 注：梅毒螺旋体目前体外人工培养还没有获得成功， 仅能通过接种兔睾丸等部位进行有限增殖。 病原学检查 病原学检查的临床意义 ： 螺旋体检查是诊断早期梅毒的最佳方法，对于患者的早期诊断、及时治疗、预后和 尽早切断传染源都有十分重 要的意义。 如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性。 血清学方法 (1) 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 （非特异性梅毒抗体） (2) 梅毒螺旋体抗原血清学试验 （特异性梅毒抗体） 问题： 为什么梅毒诊断需要上述两类血清学检测方法？ 非梅毒螺旋体抗原血清学试验原理 梅毒螺旋体一旦感染人体，宿主可对螺旋体表面的脂质作 出免疫应答，产生抗类脂抗原的抗体（非特异性抗体）。 未经治疗的病人，其血清内的非特异性抗体可长期存在。 经正规治疗后，非特异性抗体可以逐渐减少滴度至转为阴 性。 问题： 临床上非梅毒螺旋体抗原血清学试验为什么需要做定性和定量两种检测方法？ 非梅毒螺旋体抗原血清学原理 方法包括： （1）快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR) （2）甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）（3）性病研究实验室试验 (VDRL)等。 基本成分是心磷脂 卵磷脂和胆固醇 抗原抗体结合形成复合物，凝集成网状沉淀颗粒被肉 眼所见 上述方法的敏感性和特异性都基本相似 非梅毒螺旋体抗原血清学试验操作要点 1、仪器：水平旋转仪，调转速（100转/分），调转幅（18mm）。 2、定性试验 加样：吸取0.05mL血清(浆)放在卡片圈中， 并均匀地涂布在整个圈内 加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头加1滴抗原 反应：水平旋转仪旋转8分钟(23 ℃ -29 ℃） ， 亮光下观察结果 (60滴/mL，1滴=17ul ) 非梅