江苏省邳州市第二中学高三生物高考专题复习课件 《蛋白质的分离与纯化》.pptVIP

血液分层 血红蛋白 在红细胞的组成中，约90%是血红蛋白。它由四个肽链组成，包括两个α—肽链和两个β—肽链。每条肽链环绕一个亚铁血红素基团，可携带一分子氧或一分子二氧化碳。血红蛋白因含血红素而呈现红色。组卷网 分离血红蛋白溶液 小结 样品处理 1、红细胞的洗涤： 目的是去除杂蛋白。要加入柠檬酸钠防止血液凝固；离心将血液分层，用胶头吸管吸出黄色血浆；用生理盐水洗涤。 2、血红蛋白的释放： 在蒸馏水和甲苯作用下，红细胞破裂释放 3、分离血红蛋白溶液： 离心分层；滤纸过滤去除脂溶性沉淀层；分液漏斗分出红色透明液体。 4、透析： 装入透析袋并置于磷酸缓冲液中（PH为7.0）透析。 练习巩固 2.选用红细胞作分离蛋白质的实验材料，下列是其优点的是 ( )多 A．血红蛋白是有色蛋白 　　 B．红细胞无细胞核 C．红细胞蛋白质含量高 　　 D．红细胞DNA含量高 3.收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离。组卷网 ①透析的目的是__________________。 ②透析的原理是__________________。 5.下列操作正确的是（ ） A. 分离红细胞时采用低速长时间离心 B. 红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸 馏水就可 C. 分离血红蛋白溶液是低速短时间离心 D. 透析时要用20mmol/l的磷酸缓冲液，透析12h 下面关于对血红蛋白提取和分离的样品的处理措施中，正确的是 ( )多 A．采集血样后要高速短时问离心获得血细胞 B．洗涤三次后如上清液仍有黄色，可增加洗涤次数，否则血浆蛋白无法除净。 C．在蒸馏水和甲苯的作用下，细胞破裂，释放出血红蛋白 D．释放血红蛋白后再经过离心，就可以使血红蛋白和其他杂质分离开来 在蛋白质的提取和分离中，关于对样品处理过程中，分析无误的是 A洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐 B洗涤时离心速度过小，时间过短，白细胞等会沉淀，达不到分离的效果 C洗涤过程选用0.1%的生理盐水 D透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质 下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作，其中正确的是（ ） A．可采集猪血作为实验材料 B．用蒸馏水重复洗涤红细胞 C．血红蛋白释放后应低速短时间离心 D．洗脱液接近色谱柱底端时开始收集流出液 凝胶色谱法分离蛋白质的原理 利用凝胶色谱法，什么样的蛋白质先洗脱出来（ ） A.相对分子质量大的 B.溶解度高的 C.相对分子量小的 D.所代电荷多的 凝胶色谱柱取长为40 cm，内径为1．6 cm，有关说法中，正确的是( )多 A．一般凝胶色谱柱直径的大小不影响分离的效果 B．凝胶色谱柱过高超过1 m，不影响分离的效果 C．凝胶色谱柱过矮，则影响混合物的分离度 D．凝胶色谱柱直径过大会耗用过多洗脱液，样品的稀释度过大 在装填凝胶柱时，不能有气泡存在的原因是 A、气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次 序，降低分离效果 B、气泡阻碍蛋白质的运动 C、气泡与蛋白质发生化学反应 D、气泡在装填凝胶的时候，使凝胶不紧密 样品的加入和洗脱的操作不正确的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 A． 加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面 B．加样后，打开下端出口，使样品渗入凝胶床内 C．等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口 D．用吸管小心的将1ml透析后的样品加到色谱柱的顶端，不要破坏凝胶面 基础试题训练 1. 凝胶色谱法分离蛋白质的依据是（ ） A. 对其他分子的亲和力 B. 溶解度 C. 所带电荷多少 D. 相对分子质量的大小 2. 凝胶色谱法中所用的凝胶化学本质大多是 A. 糖类化合物 B. 脂质 C. 蛋白质 D. 核酸 3. 选用红细胞作为分离蛋白质的实验材料，有何好处 A. 血红蛋白是有色蛋白 B. 红细胞无细胞核 C. 红细胞蛋白质含量高 D. 红细胞 DNA含量高 4. 将搅拌好的混合液离心来分离血红蛋白溶液时，第二层是（ ） A. 甲苯 B. 血红蛋白水溶液 C. 脂溶性物质的沉淀层 D. 其他杂质的沉淀 5. 血红蛋白因含有（ ）而呈红色 A. O2 B. CO C. CO2 D.血红素 6. 下列操作正确的是（ ） A. 分离红细胞时采用低速长时间离心 B. 红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水就可 C. 分离血红蛋白溶液是低速短时间离