甘肃省会宁县第四中学高中生物选修1课件：5.2多聚酶链式反应扩增DNA片段（共35张PPT）.pptVIP

2．实验结果与分析 (1)实验中DNA含量的测定。 ①稀释：取2 μL PCR反应液，加入98 μL蒸馏水，即将样品稀释了50倍。 ②对照调零：以蒸馏水作空白对照，在波长260 nm处，将紫外分光光度计的读数调至零。 ③测定：取DNA稀释液100 μL至比色杯中，测定260 nm处的光吸收值。 ④计算：DNA含量(μg/mL)＝50×(260 nm的读数)×稀释倍数。 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 (2)理论上DNA扩增数目的计算。 DNA扩增与DNA复制一样，呈指数扩增。若只有一个DNA为模板，则复制n次后有2n个；若一开始有a个模板，则复制n次有a×2n个DNA。 (3)DNA扩增是否成功。 检测DNA片段扩增情况可以采用上述方法，也可以采用电泳检测的方法，可以通过在紫外线下直接观察DNA带的分布及粗细程度来评价扩增的效果。如果扩增不成功，则要分析失败原因。可能的原因有：漏加了PCR的反应成分、各反应成分的用量不当、PCR程序设置不当等。 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 例2下列操作过程的叙述中错误的是(　　) A．PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌 B．PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在－20 ℃储存 C．PCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后，迅速融