NY_T2727-2015蔬菜烟粉虱抗药性监测技术规程.docVIP

ICS 65.020B 16 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 2727-2015 蔬菜烟粉虱抗药性监测技术规程 Guideline for insecticide resistance monitoring ofBemisia tabaci (Gennadius) on vegetables 2015-05-21 发布 2015-08-01 实施 中华人民共和国农业部发布 ■ i i,, —i— 刖 g 本标准按照GB/T 1. 1—2009给出的规则起草。 本标准由农业部种植业管理司提出并归口。 本标准起草单位:全国农业技术推广服务中心、中国农业科学院蔬菜花卉研究所、天津市植保植 检站。 本标准主要起草人:张帅、张友军、邵振润、王少丽、杨爱宾、谢文。 蔬菜烟粉虱抗药性监测技术规程 1范围 本标准规定了琼脂保湿浸叶法对烟粉虱(aad (Gennadius)]成虫、浸垄系统测定法和叶 片浸渍法对烟粉虱若虫和卵抗药性的监测方法。 本标准适用于烟粉虱成虫、若虫和卵对常用杀虫剂的抗药性监测。 2术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 1 琼脂保湿浸叶法leaf dipping method 将浸过药液的叶碟放在玻璃管底部平铺的固体琼脂上，昆虫通过接触和取食带毒叶片而进行生物 测定的方法。 2.2 浸垄系统测定法stem dipping method 将带有供试昆虫的植物茎部插入装有药液的玻璃瓶中饲养，昆虫通过取食进入植物体内并传导扩 散的药剂而进行生物测定的方法。 2.3 叶片浸渍法 leaf-pest dipping method 将带有供试昆虫的植物叶片浸渍在药液中，昆虫通过接触药液和取食叶片而进行生物测定的方法。 3试剂与材料 3.1生物试材 试虫:烟粉虱成虫、若虫和卵。 供试植物:甘蓝苗和棉花苗。成虫采用甘蓝叶片，若虫和卵采用棉花苗。 3.2试验药剂 杀虫剂原药。 3.3试验试剂 Triton X - 100(或吐温-80);丙酮(对不易溶解的药剂，可添加其他助溶剂）；所用试剂为分析纯，水 为蒸馏水。 4仪器设备 电子天平(感量0. 1 mg); 打孔器(直径2. 2 cm); 平底玻璃管(长7. 8 cm，直径2. 2 cm); 微波炉; 移液器(5mL); 容量瓶（10 mL、50 mL、100 mL、500 mL); 量筒(500 mL); 烧杯（10 mL、25 mL、100 mL、500 mL); 塑料培养皿(直径5 cm); 吸虫器； 棕色玻璃瓶(l〇mL); 显微镜； 人工气候箱:温度(25±1)°C、相对湿度60%?80%、光照周期16 h : 8 h(L : D)。 5试验步骤 1试材准备 5. 1. 1无虫苗培育 5. 1. 1. 1甘蓝苗的培育 将甘蓝籽播种到装好土的托盘里，盖上塑料布，无虫温室内培育，4 d?5 d后出苗，待甘蓝苗生长 20 d?30 d后，即4片?5片真叶后进行分苗，在营养钵内单独培育，供测试用。 5. 1.1.2棉花苗的培育 将催芽后的棉籽播种到装好土的苗盆里，无虫温室内培育，待棉苗长出第1片真叶，叶片直径2 cm 时，从根部切断棉苗，使棉茎长度为10 cm，插人水中培养待用。 5. 1.2试虫准备 选当地具有代表性的农田2块?3块，每块田随机10点采集，每地采集烟粉虱成虫至少1 000头放 置于玻璃试管内，或采集带有伪蛹的植物叶片200片以上，带回室内饲养，鉴定烟粉虱的生物型。 接虫产卵:将棉苗放于改造过的培养皿中。培养皿改造方法如下:培养皿盖中央开一个直径3 cm 的圆孔，用直径约4 cm的60目?100 0纱网将培养皿的孔封上。在培养皿底盖侧边对应位置各开一个 直径约为1 cm的半圆，内侧贴上海绵封口，在半圆的中间位置将海绵切开一条缝隙，一侧用于放置棉 茎，另一侧用于接虫。每皿接入15对雌雄成虫产卵，24 h后移去成虫，显微镜下记录每个叶片背面卵的 数目，至少20粒。 5.2药剂配制 5. 2. 1琼脂玻璃管的制作 用三角瓶配制15 g/L?17 g/L的琼脂，用微波炉充分溶解。取出后晾5 mm?10 min，至瓶口无热 气涌出。用微量移液器吸取2 mL液体琼脂，加人到平底玻璃管底部，冷却凝固后待用。 5.2.2药剂溶解和配制 准确称取一定量的原药，用有机溶剂溶解，加人终浓度〇. 1% Triton X- 100(或0. 1 %吐温-8〇)定 容，配制成母液。用移液管吸取母液，用Triton水溶液按照等比梯度配制成5个?7个系列浓度。每个 浓度药液量不少于250 mL。 5. 3处理方法 1叶碟制作及浸药 用打孔器将新鲜、平展的甘蓝叶片打成直径2. 2 cm叶碟，避开叶脉部位。将叶碟浸于待测药液中， 10 s后取出晾干，叶背向上平铺于琼脂玻璃管中。按浓度从低到