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* * TE缓冲液 1ml 10mmol/L Tris·HCl： 10μl（ 1 mol/L Tris·HCl pH 8.0 ) 1mmol/L EDTA： 2μl （ 0.5 mol/L EDTA pH8.0 ) 加三蒸水 0.988ml 至 1 ml * * 核酸的酚抽提 原理：交替使用酚、氯仿两种蛋白质变性剂，更有效去除蛋白质。 氯仿还可加速有机相与水相的分层。 异戊醇：抑制界面泡沫的形成。 标准程序：酚——酚-氯仿——氯仿。 * * 酚抽提除去蛋白质的示意图 * * 四、实验步骤(Experimental Procedures) 等量分装在两支离心管内 加入20ul的RNase 加入等体积①提取液 4℃ 10min 酶解样品 待抽提的样品 抽提 静置 离心 配制 TE缓冲液 加等体积②提取液500ul 10000r／min离心10min 4℃ 10min 移出水相 至离心管 抽提 静置 10000r／min离心10min 加1/10 加2倍 放入 离心 移出水相 NaAc 无水乙醇 -20℃ 1-2h 12000r／min离心15min 加入 超低温冰箱 融化、离心 弃上清液 洗涤 12000r／min离心15min 干燥 4℃ 75%冷乙醇 离心 弃上清液 加TE 50μl 存放 DNA * * 核酸的沉淀 原理：核酸与钠、钾、镁形成的盐在许多有机溶剂中不溶，也不会变性。 醋酸钠为沉淀DNA、RNA的最常用盐类。 有机溶剂：乙醇、异丙醇、聚乙二醇。 温度：冰水 * * 四、实验步骤(Experimental Procedures) 等量分装在两支离心管内 加入20ul的RNase 加入等体积①提取液 4℃ 10min 酶解样品 待抽提的样品 抽提 静置 离心 配制 TE缓冲液 加等体积②提取液500ul 10000r／min离心10min 4℃ 10min 移出水相 至离心管 抽提 静置 10000r／min离心10min 加1/10 加2倍 放入 离心 移出水相 NaAc 无水乙醇 -20℃ 1-2h 12000r／min离心15min 加入 超低温冰箱 融化、离心 弃上清液 洗涤 12000r／min离心15min 干燥 4℃ 75%冷乙醇 离心 弃上清液 加TE 50μl 存放 DNA * * 四、实验步骤(Experimental Procedures) Agarose Gel Electrophoresis ： Preparation of the gel 制备0.3％琼脂糖凝胶
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