核酸的生物合成教材.ppt

DNA究竟是如何复制的？换言之，遗传信息从上一代传递到下一代是如何开始的？ 一、DNA的复制 辨认起点 辨认起点 模板DNA解除高级结构 引物RNA的合成 E. coli的RNA聚合酶催化的转录过程 DNA复制特征和RNA转录特征的比较 A-U, T-A, G-C A-T, G-C 配对 mRNA, tRNA，rRNA 子代双链DNA （半保留复制) 产物 RNA聚合酶 DNA聚合酶 酶 4种核糖核苷酸 4种脱氧核糖核苷酸 原料 模板链转录（不对称转录） 两条单链均复制 模板 RNA转录 DNA复制 （二）转录的过程 RNA转录过程可分为起始、延伸、终止三个阶段 1.起始 包括四个方面 σ亚基起着识别DNA分子上起始信号的作用 识别启动子 RNA聚合酶结合模板DNA的部位，称为启动子(promoter)。 生成封闭型启动子复合物 得到开放型的启动子复合物 σ亚基被释放脱离核心酶 DNA构象活化 解开DNA双链，识别其中的模板链 该部位应该富含A-T碱基对，有利于DNA解链 动画演示转录启动过程…... σ ? ? σ ? ? 形成闭合启动子复合体 形成开放启动子复合体 RNA聚合酶识别结合启动子 转录开始 启动子清除 ? ? 转 录 延 伸 5’ 3’ 3’ 5’ -35 -10 +1 另外： 在起始位点的全酶结合第一个三磷酸核苷常是 GTP或ATP。 形成的启动子、全酶和三磷酸核苷复合物称为 三元起始复合物。第一个核苷酸掺入的位置称 为转录起始点。 5’ 3’ 2.延伸 核心酶沿模板移动，并按模板序列选择下一个核苷酸，将核苷酸加到生长的RNA链3′-OH端，催化形成磷酸二酯键。 RNA-DNA的杂交区 5’ 3’ 杂交区结合不太牢固，解链后，DNA又恢复双螺旋结构 DNA拓扑异构酶Ⅰ型通过形成短暂的单链裂解-结合循环，催化DNA复制的拓扑异构状态的变化； 特点：剪切一条链，不需要ATP 拓扑异构酶Ⅱ型 通过引起瞬间双链酶桥的断裂，然后打通和再封闭，以改变DNA的拓扑状态。 特点：剪切两条链，需要ATP 4）单链结合酶 定义：结合于因DNA双链打开而形成的单股DNA链上的酶，称为单链机结合酶（DNA结合蛋白）。 意义：维持模板链处于单链状态； 保护单股DNA链不被核酸酶水解。 5）DNA连接酶 DNA连接酶，即连接两个冈崎片段； 一片段DNA链上脱氧核苷酸的3?羟基和相邻另一片段DNA链上脱氧核苷酸的5?磷酸基团，形成磷酸二酯键，从而把两个片段的DNA链连接起来。 5? 3? 5? 3? 5? 3? 5? 3? P HO DNA连接酶 ATP ADP 形成磷酸二酯键 根据目前的知识，可将DNA复制的过程大体分为三个阶段：起始、延伸和终止。 1.复制的起始 DNA合成的起始包括：起点的识别、模板DNA超螺旋及双螺旋的解除、引物的合成 复制的起始 （三）DNA的复制过程 DNA复制有固定的起点（origin, ori)，即复制起点的一段特殊DNA序列。 区别：原核细胞中只有一个复制起点，而真核细胞DNA双链有多个复制起点。 E.coli 复制起始点 oriC 复制的起始 辨认起点 (举例） E.coli 复制起始点 oriC GATTNTTTATTT ··· GATCTNTTNTATT ··· GATCTCTTATTAG ··· 1 13 17 29 32 44 ···TGTGGATTA-‖-TTATACACA-‖-TTTGGATAA-‖-TTATCCACA 58 66 166 174 201 209 237 245 同向重复序列 反向重复序列 5? 3? 5? 3? 富含A、T 复制的起始 辨认起点 （举例，特点） 复制起点的一般特征: ① 由多个独特的短重复序列组成。 ② 短重复序列能够被酶识别并结合。 ③ 一般富含A、T，利于双螺旋DNA解旋，以产生单链DNA复制模板。 需要的酶：解螺旋酶、拓扑异构酶和DNA结合蛋白 复制的起始 辨认起点 （举例，特点） 解除高级结构 （复制叉） 详细作