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Western
一、仪器与试剂及耗材
1）仪器：
2）试剂：
3）杂品与耗材：
二、试剂配制：
1、母液
1）1.0mol/L Tris-HCl
Tris (MW121.14) 30.29g
超纯水 200ml
溶解后，用浓HCl调 pH 至所需点（见下所示），最后用蒸馏水定容至 250ml，高温灭菌后室温下保存。
PH HCl
7.4 约 17ml
7.5 约 16ml（所需18.5）
7.6 约 15ml
8.0 约 10ml
2）1.5mol/L Tris-HCl（pH 8.8）（实际：用玻璃瓶配制50ml或100ml，其他材质会被盐酸腐蚀。）
Tris (MW121.14) 9.086g 18.172g 36.344g 45.43g
超纯水至 40ml 80ml 160ml 200ml
加浓盐酸量 1.4ml 2.8ml 5.6ml 7ml
定容至 50ml 100ml 200ml 250ml
溶解后，用浓盐酸调 pH 至 8.8，最后用超纯水分别定容至50ml、100ml、200ml
、 250ml，高温灭菌后室温下保存。
3）0.5mol/L Tris-HCl（pH 6.8）（实际：用玻璃瓶配制50ml或100ml，其他材质会被盐酸腐蚀。）
Tris (MW121.14) 3.028g 6.056g 12.112g 15.14g
超纯水至 40ml 80ml 160ml 200ml
加浓盐酸量 1.8ml 3.6ml 7.2ml 9.0ml
定容至 50ml 100ml 200ml 250ml
溶解后，用浓盐酸调 pH 至 6.8，最后用超纯水分别定容至50ml、100ml、 200ml、250ml，高温灭菌后室温下保存。
4）1.74mg/ml（10mmol）PMSF（实际：一次性离心管配制5或10ml）
PMSF 0.0174g 0.0435g 0.087g 0.174g
异丙醇 10ml 25ml 50ml 100ml
溶解后，高压灭菌，-20℃保存。
5）10％SDS（实际：一次性离心管配制5或10ml）
SDS 0.5g 1g 2g 10g
蒸馏水至 5ml 10ml 20ml 100ml
50℃水浴下溶解，室温保存。如在长期保存中出现沉淀，水浴溶化后，仍可使用。
6）10％过硫酸胺（AP）（实际：一次性离心管配制0.1或0.5ml）
过硫酸胺 0.01g 0.05 0.1g
超纯水至 0.1ml 0.5ml 1.0ml
溶解后，4℃保存，保存时间为 1 周。最好现用现配
7）40％Acr/Bic（37.5：1）（实际：一次性离心管配制50ml。）
丙稀酰胺（Acr） 18.75g 37.5g
甲叉双丙稀酰胺（Bic） 0.5g 1g
超纯水至 50ml 100ml
37℃下溶解后，4℃保存。使用时恢复至室温且无沉淀。
8）20％Tween20（实际：一次性离心管配制10ml）
Tween20 2ml 5ml 10ml 20ml
蒸馏水至 10ml 25ml 50ml 100ml
混匀后 4℃保存。
9）0.2mol/L NaH2PO4
NaH2PO4（MW 119.98） 12g
蒸馏水至 500ml
溶解后，高压灭菌，室温保存。
10）0.2mol/L
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