第九章 生物大分子的分离与纯化技术.pptxVIP

第九章 生物大分子的分离与纯化技术;第九章 生物大分子的分离与纯化技术;9.1.1 生物大分子分离纯化的特殊性;9.1.2 生物大分子分离技术;9.2 蛋白质的反相色谱（RPC）;9.2.2 色谱条件;④ 检测：用紫外检测器，检测波长280nm 和220nm。;9.2.3 应用;9.3 疏水相互作用色谱 ;配基和蛋白质分子之间的吸附推动力和样品组分的洗脱机理 （即：溶质在色谱中的保留行为）：;结论;9.3.2 填料;1、流动相的组成 ;2、流动相的pH值 ;9.3.4 疏水作用色谱的应用 ;例如：基因重组人干扰素r是一种基因工程产品，其粗品是7mol/L盐酸胍溶液。干扰素在盐酸胍 溶液中处于可逆性失活状态。因盐浓度太高无法直接上其他柱，除去盐酸胍后干扰素又容易 析出来。若使用疏水作用色谱柱，将此样品直接进样，既脱除了盐酸胍，又达到 了复性的效果。而且一步分离后，干扰素纯度可达到90%。;疏水作用色谱与反相色谱的区别;9.4 亲合色谱 (Affinity Chromatography) AC;9.4.2 填料 （由基质、间隔臂和配体三部分组成）;9.4.3 实验技术 ;3、流动相 （有平衡液和洗脱液两种）;硫醇—二硫化物交换色谱可以用来纯化许多含硫醇的蛋白质 ;5、其他色谱条件 ;9.4.4 应用;9.5 电泳分离技术 ;9.5.1 凝胶电泳（主要介绍聚丙烯酰胺凝胶电泳 ）;形成凝胶的反应式;4、连续与不连续平板凝胶电泳 ;5、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳 ; 6、凝胶电泳的应用 ;9.5.2 聚焦电泳（又叫等电点聚焦 ）;等电聚焦的特点是：;1、原理;2、两性载体 ;3 等电聚焦 ;9.6 超离心技术简介 ;9.6.2 密度梯度离心（又叫速率区带离心法 ）;思 考 题