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第五章 核酸化学 核酸概述 核酸的化学组成 核酸的分子结构 核酸的重要性质 核酸研究技术 第一节 核酸概述 一、核酸的研究历史 1869 瑞士 F.Miescher从外科绷带脓细胞的细胞核中分离出一种有机物，称为核素，由于它有很强的酸性，后改称为核酸。 人类阔步迈进后基因组时代 1990年 美国 人类基因组计划（Human Genome Project，HGP） 30 亿美元 “人体地图” 10 万基因 1999年 中国加入HGP 2001年 Nature、Science共同发表 后基因组时代（post-genome era）：研究各种基因的功能与调节。 二、核酸的种类、分布和功能 （一）DNA 脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid）; 功能：遗传信息的贮存； 分布： 真核生物：细胞核为主，细胞器为辅； 原核生物：类核区、质粒 病毒 （二）RNA 核糖核酸（ribonucleic acid）； 功能：多样，主要参与遗传信息的表达； 主要种类：rRNA（ribosomal RNA） mRNA（messenger RNA） tRNA（transfer RNA） 分布：细胞质为主，细胞核为辅；病毒 第二节 核酸的化学组成 一、核酸的元素组成 基本元素：C、H、O、N、P 特点： 一般不含S； P含量恒定（DNA 9.9%，RNA 9.5%），可用定磷法进行核酸的定量分析。 二、核酸的分子组成 1、戊糖 2、碱基 稀有碱基 都是基本碱基的化学修饰型 嘌呤：如黄嘌呤（X） 、次黄嘌呤（I）等 嘧啶：如二氢尿嘧啶（D）、 5-甲基胞嘧啶等 核苷酸命名： M-单（D-二、T-三）；P-磷酸；d-脱氧 RNA中：某苷（单、二、三）磷酸 DNA中：脱氧+某苷（单、二、三）磷酸 稀有核苷酸命名与之类似 4、重要的核苷酸衍生物 1）ATP（腺嘌呤核糖核苷三磷酸） 2）辅酶核苷酸 3）环化核苷酸 cAMP、cGMP 功能：细胞之间传递信息（第二信使） 环状磷酯键是高能键。pH7.4水解能约为43.9kJ/mol 4）糖基载体 ADPG、UDPG 第三节 核酸的分子结构 一、核酸的一级结构 概念：各核苷酸残基沿核酸链的排列顺序 连接键：3’,5’-磷酸二酯键 方向：5’→3’ 二、DNA的高级结构 1953年，Watson和Crick 根据DNA中碱基的物化数据和酸碱滴定、DNA碱基组成的定量分析、DNA纤维的X-衍射图谱，提出了DNA双螺旋结构模型。 Chargaff定则： 1）碱基组成有种属的特异性，但没有组织器官的特异性； 2）在DNA中，[A]=[T]，[G]=[C]； 3）生物DNA碱基组成不会因为年龄、营养、环境的改变而改变。 DNA分子由两条多核苷酸单链组成。两条链沿着同一根轴平行盘绕，形成右手双螺旋。螺旋中的两条链方向相反，一条链的方向为5’→3’，而另一条链的方向为3’→5’，螺旋上有一个大沟和一个小沟。 碱基位于螺旋内侧，磷酸和脱氧核糖位于螺旋外侧，形成DNA分子的骨架。碱基平面与螺旋轴垂直，糖环平面与螺旋轴平行。 螺旋横截面的直径约2 nm，相邻两个碱基平面之间的距离为0.34 nm，每10bp形成一个螺旋，螺矩3.4 nm。 螺旋内部碱基配对存在，AT之间形成两个氢键，GC之间形成三个氢键； 碱基在一条链上的排列不受限制。 2、意义 大大推动了分子生物学和分子遗传学的发展，被誉为20世纪最伟大的发现之一。 第一次准确地阐述了DNA作为遗传信息的结构基础和遗传信息传递的基本方式； 最主要的成就是碱基互补配对。 3、稳定因素 DNA双螺旋结构在生理条件下很稳定。 稳定因素： 氢键 碱基堆积力（以疏水作用力为主） 离子键 4、DNA螺旋结构的多样性 （二）DNA的再压缩及包装 数据：人的体细胞DNA长2m，细胞核直径0.05mm。 DNA双螺旋分子需要进一步扭曲和折叠以压缩分子空间。 原核生物DNA、真核生物细胞器DNA进一步形成超螺旋。真核生物染色体DNA则进一步形成核小体。 真核生物染色质的基本单位是核小体。 核小体由200bp DNA和组蛋白（1:1）构成。 组蛋白H2A，H2B，H3和H4各两分子构成组蛋白八聚体，DNA双螺旋分子缠绕其上1.75圈（146bp），形成核小体的核心颗粒。 核心颗粒之间由DNA和组蛋白H1连接。 三、RNA的结构 戊糖是核糖，碱基中有U，而没有T； 大多数RNA分子是单链，不遵守碱基种类的数量比例关系； 局部的碱基互补配对（A-U、C-G），不能配对的部分，形成突环--