第5章 培养基.pptVIP

三、配制培养基的一般要求 1. 根据不同微生物的营养和反应需求，设计培养基。营养物质的组成比较丰富，浓度恰当，能满足菌种发芽和生长繁殖成大量有生理功能菌丝体的需要，能够满足产物最经济的合成； 2. 在一定条件所采用的各种成分(生产上常称为原材料)彼此之间不能产生化学反应，理化性质相对稳定； 3. 粘度适中，具有适当的渗透压； 4. 要考虑所选用的原材料的品种和浓度与代谢产物生物合成过程中的调节关系； 5. 发酵后所形成的副产物尽可能的少； 6. 培养基的原料应因地制宜，价格低廉；且性能稳定，资源丰富，便于采购运输，适合大规模储藏，能保证生产上的供应； 7. 所选用的培养基应能满足总体工艺的要求，如不应该影响通气、提取、纯化及废物处理等。 按其组成物质的来源、状态、用途等分类。 １.按来源 合成培养基 原料化学成分明确、稳定，实验重现性好，适合于研究菌种基本代谢和过程的物质变化规律 。 培养基营养单一，价格较高，不适合用于大规模工业生产。  一.培养基的种类 第二节 培养基的类型 天然培养基: 采用天然动植物产品 原料来源丰富(大多为农副产品，如花生饼粉、酵母膏等)、价格低廉、并且营养丰富，适于工业化生产 。 原料质量等方面不加控制会影响生产稳定性。 固体培养基 :适合于菌种和孢子的培养和保存，也广泛应用于有子实体的真菌类，如香菇、白木耳等的生产。 半固体培养基:即在配好的液体培养基中加入少量的琼脂，一般用量为0.5%～0.8% ，主要用于微生物的鉴定，细菌运动特征的观察，噬菌体效价的测定。 液体培养基:80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的营养成分，是发酵工业大规模使用的培养基。 ２.按状态 孢子（斜面）培养基 种子培养基 发酵培养基 ３.按培养目的（从生产应用考虑） 生产菌在整个代谢活动中，根据其生长阶段和生产阶段的不同需求，设计组成不同的培养基。 ①孢子培养基 培养基能使孢子迅速发芽和生长，能形成大量的优质孢子，但不能引起菌种变异。 孢子培养基中的基质浓度(特别是有机氮源)要低些，否则影响孢子的的形成。无机盐要适量，否则影响孢子的数量和质量。 生产中常用的孢子培养基有麸皮培养基，大(小)米培养基，由葡萄糖(或淀粉)、无机盐、蛋白胨等配制的琼脂斜面培养基等。 ②种子培养基 供孢子发芽和菌体生长繁殖用的。营养成分应是易被菌体吸收利用的，同时要比较丰富与完整，其中氮源和维生素的含量应略高些，但总浓度以略稀薄为宜，以便菌体的生长繁殖。 常用的原材料有葡萄糖、糊精、蛋白胨、玉米浆、酵母粉、硫酸铵、尿素、硫酸镁、磷酸盐等。 注意：设计种子培养基时要考虑与发酵培养基组成 的内在联系。 ③发酵培养基 发酵培养基是供菌体生长繁殖和合成大量代谢产物用的。培养基的组成应丰富完整，营养成分浓度和粘度适中，利于菌体的生长，进而合成大量的代谢产物。 配制发酵培养基注意： 考虑菌体在发酵过程中的各种生化代谢的协调； 产物合成期，发酵液pH值没有波动； 原材料质量相对稳定。 4.按用途划分 ②选择性培养基(selective medium)：根据某种或某一类群微生物的特殊营养需要，或对某种化合物的敏感性不同而设计出来的一类培养基。利用这种培养基可用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来. ③鉴别性培养基(differential medium)：用于鉴别不同类型微生物的培养基，常在普通培养基中加入能与某种代谢产物发生反应的指示剂或化学药品，从而产生某种明显的特征性变化，以区别不同的微生物，例：伊红美兰乳糖培养基（Eosin Methylene Blue） ①基础培养基(minimum medium): 含一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基 5.微生物类群来分 细菌培养基——营养肉汤（nutrient broth)： 牛肉膏 3g； 水 1000ml； 蛋白胨 5g ； pH 7.2~7.4 放线菌培养基——高氏1号： 可溶性淀粉 20g； KNO3 1g; K2HPO4 1.0g