蛋白质(本)说课.ppt

球状蛋白质 球状蛋白质三维结构特征 含多种二级结构元件 具有明显的折叠层次 是紧密的球状或椭球状实体(活性部位密度较低) 疏水侧链埋藏在分子内部,而亲水侧链暴露在表面 表面有一个空穴 疏水环境 膜蛋白的结构 膜周边蛋白质：可溶性球状蛋白质，分布在膜双脂层的表面，通过与膜内在蛋白质的静电相互作用和氢键键合相互作用与膜结合 膜内在蛋白质：与脂双层强缔合的膜蛋白 脂锚定蛋白质：通过共价连接的脂锚钩与膜缔合 膜蛋白 膜内在蛋白质 膜内在蛋白质 1. 通过一段小的疏水肽链锚定于膜，蛋白质大部分位于膜的一侧或两侧伸展于水环境中 2. 近似球形，大部分蛋白质埋在膜中 主要由α螺旋或β折叠片构成 具单个跨膜肽段的膜蛋白 具7个跨膜肽段的膜蛋白 β桶形膜蛋白-膜孔蛋白 脂锚定蛋白质 脂锚钩：瞬时性；是真核细胞中控制信号转导途径 酰胺连接的豆蔻酰锚钩 硫酯连接的脂肪酰锚钩 硫醚连接的异戊二烯基锚钩 糖基磷脂酰肌醇锚钩 膜的结构 亚基缔合与四级结构* 蛋白质的四级结构涉及亚基种类和数目以及各亚基或原聚体在整个分子中的空间排布包括亚基间的接触位置（结构互补）和作用力（主要为非共价相互作用） 亚基缔合的驱动力主要是疏水作用和二硫键的形成 概念：同多聚蛋白质、杂多聚蛋白质、原聚体 四级结构 亚基相互作用的方式 亚基结合的专一性由相互作用的表面上的极性基团之间的氢键和离子键提供 相同亚基之间的缔合 不同亚基之间的缔合 四级结构的对称性 同种缔合 异种缔合 四级结构的作用* 1. 增强结构稳定性 2. 提高遗传经济性和效率 3. 使催化基团汇集在一起 4. 具有协同性和别构效应 蛋白质结构与功能的关系 蛋白质一级结构决定高级结构 多肽链的二级结构决定于短程序列， 三维结构取决于长链序列 核糖核酸酶的变性与复性 蛋白质的变性可逆？ 蛋白质的理化性质 蛋白质的性质与它的分子大小、结构和作为它们基本成分的氨基酸的性质密切相关。除分子量比氨基酸大及结构比氨基酸复杂外，蛋白质的许多性质与氨基酸相同。 蛋白质溶液的渗透压较低；蛋白质分子表面带有水化膜，使蛋白质溶液的流动阻力及粘度都较大； 蛋白质的理化性质 （1） 蛋白质的两性解离及等电点 （2） 蛋白质的胶体性质 （3） 蛋白质的沉淀作用 （4） 蛋白质的变性及凝固 （5） 蛋白质水解作用 （6） 蛋白质氧化-还原作用 （7） 蛋白质的颜色反应 蛋白质的两性解离及等电点(p290) 当蛋白质溶液处于等电点时，其溶解度最小；粘度、渗透压、膨胀性及导电能力也降为最低值。 返回 蛋白质的电泳 蛋白质在等电点pH条件下，不发生电泳现象。利用蛋白质的电泳现象，可以将蛋白质进行分离纯化。（p307） SDS测定蛋白质分子量 p298 蛋白质的胶体性质p299 1. 具有胶体的一切特性（布郎运动、丁达尔现象、电泳、不能透过半透膜、具有吸附能力） 2. 亲水胶体（稳定性 水合作用、双电层） 3. 溶胶 凝胶 返回 （蛋白质颗粒分散在水中） （水分散在蛋白质颗粒中） 凝胶过滤p303 应用-分子量的测定p297 HiTrap Chelating 5 ml Mr 160 000 蛋白质的洗脱体积与分子量的对数呈线性关系 蛋白质的沉淀反应p300 1. 盐析 2. 有机溶剂沉淀反应 3. 重金属盐沉淀反应 4. 沉淀剂沉淀反应 蛋白质的沉淀反应 1.盐析：将中性盐类加于蛋白质溶液中，使其从溶液中沉淀析出。 感胶离子序：Mg2+Ca2+Sr2+Ba2+Li+Na+K+Rb+Cs+；C6H5O73-C4H4O63-SO42-CH3COO-Cl-NO3- 2. 有机溶剂沉淀：（有机溶剂亲水性蛋白质） 3. 重金属沉淀反应： 蛋白质+重金属（Zn2+、Cu2+、Hg2+、Pb2+、Fe2+） 蛋白质金属盐 4. 有机酸沉淀剂的沉淀反应： （苦味酸、磷钨酸、磷钼酸、鞣酸、三氯醋酸、磺酰水杨酸）+蛋白质 沉淀（pH等电点） 返回 蛋白质的变性及凝固*p233 概念：蛋白质受到外界因素的影响，使构成空间结构的氢键等遭受破坏，导致二级、三级结构发生变化，天然蛋白质的空间构型解体，使天然蛋白质的理化特性改变并失去原有的生理活性。 影响因素： 温度： 有机溶剂： 酸、碱： 蛋白质的变性 变性蛋白质的特性 1.物理性质的改变：旋光值改变，粘度增加，失去结晶能力，溶解度下降，发生絮凝、沉淀 2.化学性质的改变：变性蛋白质易被酶水解，消化率提高； 3.生物性能的改变：蛋白质变性后抗原性改变，生物功能损失，激素失去生理调节作用，抗体失去与抗原结合的能力。 返回 蛋白质的氧化-还原反应 蛋白质分子中对氧化反应最灵敏的是半胱氨酸的-SH键：