船长系列转录后的加工修饰说课.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * 模板来自于 * * 模板来自于 * * 模板来自于 * 模板来自于 * 模板来自于 * 模板来自于 * 模板来自于 * * * 6666位C脱氨，C→U,CAA → UAA,翻译中止。 * * * * * * * * * * * 模板来自于 * * * * * * * * * * * 模板来自于 * 模板来自于 * * * * * * * * * * * * * * 四膜虫rRNA的结构 四膜虫rRNA内含子的二级结构 四膜虫rRNA的剪接采用自我剪接方式 5′-端核苷酸序列 与mRNA和rRNA剪接不同，负责tRNA加工的酶全是蛋白质构成。 tRNA前体 RNA pol Ⅲ TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA 真核生物tRNA的转录后加工 RNaseD RNaseP切除 核酸内切酶 tRNA连接酶 甲基化 还原等稀有碱基修饰 tRNA的转录后加工 16 个核苷酸 的5’端前导区 14个核苷酸 的内含子 3’ 端2个额外的核苷酸 四个亚基组成的核酸内切酶切除内含子（蓝色部分） tRNA核苷酸转移酶、连接酶 ADP ATP tRNA的转录后加工 碱基修饰 （2）还原反应 如：U ? DHU （3）核苷内的转位反应 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） 核酶(ribozyme) 核酶：本质为RNA 或以RNA 为主含有蛋白质辅基的一类物质 最简单的核酶呈槌头结构。 核糖核酸 （ribonucleic acid ） 酶（enzyme ） 一般的酶是纯的蛋白质，而核酶是 但和酶又有区别，主要表现在两个方面： ①一般的酶是纯的蛋白质，而核酶是RNA 或带有蛋白的RNA。 ②核酶既是催化剂又是底物，随着反应的进行，本身也消失了。而酶却不同，仅催化反应，反应前后其本身的质和量都不发生改变。 01 核苷酸转移作用 02 水解反应，即磷酸二酯酶作用 03 磷酸转移反应，类似磷酸转移酶作用 04 RNA内切反应，即RNA限制性内切酶作用 05 催化水解多核苷酸内部的磷酸二酯键 大多数核酶通过催化转酯反应和磷酸二酯键水解反应，参与RNA自身剪切、加工过程。 与蛋白质酶相比，核酶的催化效率较低，是一种较为原始的催化酶。 核酶的功能 锤头状核酶长约58 个核苷酸，由 三个局部碱基配对的茎区 、 两个单链区和突出的核苷酸构成。该酶可分为3个部分，中间是以单链形式存在的13个保守核苷酸组成的催化核心 ，两侧的茎 区为可变序列，共同组成特异性序列，决定核酶的特异性。 最简单的核酶二级结构——槌头状结构(hammerhead structure) H代表除了G之外的任何碱基 RNA Hammerhead Ribozyme?(Tuschl,1994), Chain a: salmon Chain b: white, Catalytic site: colors 核酶研究的意义 核酶的发现，对中心法则作了重要补充； 核酶的发现是对传统酶学的挑战； 对进化的研究有帮助核酶反映了进化的早期阶 段RNA 可能既是信息的载体，又具有催化的功能，在进化的过程中这两者开始分化，将携带信息的功能交给DNA ，使得遗传信息更为稳定、丰富；将催化的功能交给蛋白，使得催化功能更为特异和多样。； 利用核酶的结构设计合成人工核酶,应用于疾病的治疗。 人工设计的核酶 粗线表示合成的核酸分子 细线表示天然的核酸分子 X 表示一致性序列 箭头表示切断点 1.一个真核核糖体含有4种不同的rRNA分子和大概82种蛋白质，为什么细胞含有的rRNA基因的拷贝数比核糖体蛋白的基因多 2.总结真核mRNA，tRNA，rRNA转录后修饰 3.剪切体内含子的剪切机制 CHECK YOUR UNDERSTANDING Indicate the -10 region, the -35 region, and the initiating nucleotide on the sense strand of the E. coli tRNA promoter shown below. CHECK YOUR UNDERSTANDING Tyr * * * * 模板来自于 * * * * * * 模板来自于 * * * * * U6更容易和5’剪切位点结合，故置换U1。U4也排挤出剪切体 U4/U6-U5复合物加入 U6，U2形成特殊构象，A-2’OH攻击内左 OH亲核攻击外左 外显子连接 内含子套索含U一起，然后被降解 BBP (branch-point binding protein)和U2AF与分支