第二章 纯培养和显微技术.ppt

蚌埠学院 食品与生物工程系 * 革兰氏染色法 The Gram-stain technique was developed by the Danish bacteriologist Christian Gram in 1884. It divides bacteria into 2 groups, Gram-positive (G﹢) and the Gram-negative (G﹣) 1、用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染 2、用碘液进行媒染，其作用是提高染料和细胞间的相互作用，使二者结合得更牢固。 3、用乙醇或丙酮冲洗进行脱色。在经历脱色后仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细菌，而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉，细胞呈无色。 4、用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对涂片进行复染。例如沙黄，它使原来无色的革兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色，而革兰氏阳性细菌继续保持深紫色 蚌埠学院 食品与生物工程系 * 注意：染色前必须先对涂在载玻片上的样品进行固定，其目的有二： 一是杀死细菌并使菌体粘附于玻片上； 二是增加其对染料的亲和力。 常用固定方法：酒精灯火焰加热和化学固定。 固定时应注意尽量保持细胞原有形态，防止细胞膨胀和收缩。 蚌埠学院 食品与生物工程系 * 蚌埠学院 食品与生物工程系 * Gram stain of G+ Staphylococcus cells. G