微生物酶资源的开发利用剖析.ppt

六、最佳产酶条件的初步确定 1. 培养方式的确定——固体法；液体法 2. 最佳培养条件组合 3. 胞内酶和胞外酶 胞外酶具有以下一些优点： （1）分离提取容易，且不必破碎细胞，因而也就省去了去除核酸的工艺； （2）胞外酶的生产不受可获得生物量的限制，因而容易得到较高的酶产量； （3）胞外酶活性显现的最适条件与产酶菌株的最适生长条件往往一致。 与之相反，以胞内酶为商品酶生产的酶源，不仅生产工艺复杂，而且酶合成量的提高往往受“饱和”效应的限制，甚至给细胞带来毒性。 注意：并不是所有的酶都可找到其相应的胞外酶产生菌，少数一些酶就只能在微生物细胞内生成。比如葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、蔗糖酶、乳糖酶等。另外，用于分子生物学研究的多聚核苷酸磷酸化酶、核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶、DNA聚合酶等也属于胞内酶。 可采取措施：在实验室水平上多用冻融、研磨或超声波法来破碎细胞壁。在工业应用上还可通过控制培养温度的办法使细胞自溶来获取目的酶。如酿酒酵母来生产蔗糖酶就是一个很好的例子。 4. 微生物酶收集的时间顺序 酶的积累发生在菌体生活周期中的哪一个阶段，随着各菌种和酶的不同有很大变化。除了延迟期外，在生长周期中的任何一个阶段，都可以大量出现所需要的酶。 在某些情况下，胞外酶在对数生长期的早期就开始出现，并且在以后的几个阶段中继续增