【步步高】人教版2016年高三生物第二轮复习课件专题八第2讲分析.pptVIP

(3)用量比例不同，结果也不同 考点三　血红蛋白的提取和分离 重点提炼 命题视角 题组　从蛋白质提取与分离技术展开命题 重点提炼 1．提取血红蛋白过程中样品的预处理及粗分离 红细胞 的洗涤 血红蛋白 的释放 分离血红 蛋白溶液 2．血红蛋白的提取和分离原理及方法 (1)原理：蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等，可以用来分离不同种类的蛋白质。 (2)分离方法：①凝胶色谱法：也称做分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。②电泳法：电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。常用的电泳法有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。 1．在猪血红蛋白提纯中，洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止细胞破裂(2011·广东，5A)(　　) 2．利用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量小的先洗脱出来(　　) 3．在电泳过程中，蛋白质分子的移动速率，与分子本身的大小和形状无关，而与所带电荷的差异有关(　　) 4．猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，猪血红蛋白提纯时杂蛋白较少(2011·广东，5B)(　　) 错混诊断 √ × × √ 命题视角 题组　从蛋白质提取与分离技术展开命题 1．红细胞中含有大量的血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白。下列对血红蛋白提取和分离的叙述，错误的是(　　) A．血红蛋白提取和分离一般按照样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定的顺序进行 B．纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液 C．粗分离中透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质 D．可经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定 解析　蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。提取和分离血红蛋白时，首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品处理；再通过透析法除去相对分子质量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量较大的杂蛋白除去，即样品纯化，纯化过程中凝胶应用蒸馏水充分溶胀后，配制成凝胶悬浮液，而不是用生理盐水；最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。 答案　B 2．红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题： (1)血红蛋白提取和分离一般可分为四步：__________、______________、______________和______________。 (2)实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。 ①加入柠檬酸钠的目的是_____________________________。 ②以上所述的过程即是样品处理，它包括____________、______________、分离血红蛋白溶液。 (3)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。样品纯化的目的是_______________________________________________________。 (4)电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及____________、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速率，从而实现样品中各种分子的分离。 解析　分离、提取血红蛋白的实验流程大致是样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定四个步骤。柠檬酸钠属于抗凝剂。血红蛋白是红色含铁的蛋白质。凝胶色谱法分离蛋白质主要是依据蛋白质的相对分子质量大小来进行的。 答案　(1)样品处理　粗分离　纯化　纯度鉴定 (2)①防止血液凝固　②红细胞的洗涤　血红蛋白的释放 (3)通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂蛋白除去 (4)分子本身的大小 技法提炼 “血红蛋白的提取和分离实验”中的注意事项 (1)红细胞的洗涤：洗涤次数不能过少，否则无法除去血浆蛋白；要低速、短时离心，否则会使白细胞等一同沉淀，达不到分离的效果。 (2)凝胶的预处理：用沸水浴法不但节约时间，而且除去凝胶中可能带有的微生物，排除胶粒内的空气。 (3)色谱柱的装填：装填时尽量紧密，减小颗粒间隙；无气泡；洗脱液不能断流。 (4)色谱柱成功的标志：红色区带均匀一致地移动。 专题八 生物技术实践 1.果胶酶在果汁生产中的作用。 2.菊花的组织培养。 3.血红蛋白的提取和分离。 考纲要求 酶的应用和生物技术在 第 讲 2 其他方面的应用 构建网络 栏目索引 考点一　果胶酶在果汁生产中的作用 考点三　血红蛋白的提取和分离 考点二　植物组织培养 考点一 果胶酶在果汁 生产中的作用 重点提