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果蝇的饲养、形态与性状观察 1.了解果蝇用于遗传学研究的一些背景知识 2.学会果蝇的饲养和麻醉等操作 3.观察果蝇的形态、性别和其它性状 实验目的: 果蝇:遗传学研究的好材料 个体小、易于操作 生活周期短 后代多 突变体多 4对染色体 Drosophila melanogaster (fruit fly, 黑腹果蝇) Model organism 果蝇的饲养 raise culture medium 麻醉、操作:乙醚/CO2;麻醉器、毛笔、白纸/白瓷板、小烧杯 等 20-25 ℃ 培养基:玉米粉 或香蕉 或米粉 A: 9g玉米粉 + 37ml H2O,加热,搅拌,调成糊状; B:6.5g红糖 + 0.6g Agar + 37ml H2O,加热,搅拌,煮匀; 将A ,B 混合,加 1ml 苯甲酸,再加热,搅拌,调成糊状, 分装入5-8支试管,121℃ ,高压灭菌20分钟,取出后,冷却备用(使用前加入少许酵母菌液) 4 stages: 果蝇的生活史/life cycle 25℃时从卵到成虫约10-12天 - egg (卵) - larva(幼虫) - pupa (蛹) - adult (成虫) Metamorphosis /变态 Egg 卵 Adult 成虫 larva幼虫 pupa 蛹 white eye 白眼 眼/eye wild type(野生型,+) X 染色体 突变体/Mutants (II) 突变体/Mutants (I) vestigial (残翅,vg) miniature(小翅,m) Wing /翅 II 染色体 果蝇常见的突变性状 突变性状 基因符号 性 状 特 征 所在染色体 白眼 棒眼 黑檀体 黑体 黄身 残翅 焦刚毛 小翅 w B / Bar e / ebony b y vg/vestigial sn m/miniature 复眼白色 复眼纵条形 体呈乌木色,黑亮 体呈深黑色 体呈浅黄色 翅退化,部分残留 刚毛卷曲如烧焦状 翅较短,仅至腹端 X X III R ⅡL X ⅡR X X 其它突变体示意图 性别差异/sex difference Size/体型 Male /雄 Female /雌 Abdomen /腹部 Sex comb/性梳 Genome/基因组 雌 雄 黑腹果蝇染色体核型图 (2n=8) 果蝇基因/基因组数据库 / Species果蝇种类 / (2n=12) Handling the Flies:anaesthetize果蝇的麻醉操作要点 (I) 往“麻醉器”中滴加2-3滴乙醚/ether; 轻拍饲养瓶,将果蝇赶离瓶口; 将“麻醉器”/etherizer 口套在饲养瓶口,倒转; 轻拍饲养瓶,使果蝇麻醉并掉落“麻醉器”收集盖; - 打开收集盖,将麻醉的果蝇倒在白纸上; 果蝇的麻醉操作要点(II) 观察果蝇麻醉程度:麻醉致死的果蝇其翅膀与身体呈45度角; 用放大镜或解剖镜、在低倍镜下观察果蝇的形态、性状; 如有必要,可滴加少量乙醚于白纸,用平皿盖住苏醒的果蝇,使其再麻醉; - 用毛笔将果蝇移入饲养瓶,平放直到果蝇苏醒。 Your turn…课堂操作 1,配制果蝇培养基(小组); 2,将果蝇麻醉致死(小组),各自观察、记录果蝇的形态、性状,鉴别雌雄,找出性梳。 小组提交果蝇性状记录表。 果蝇的性状记录表 性状 编号 x e 22# 18# 6# 2# 体色 眼色 翅形 刚毛形态 性别 数量 表现型 -- X 为去年底果蝇杂交实验 的后代 (Fn) Take-home message Drosophilia Model organism Life cycle (4 stages, metamorphosis) Mutants Sex comb Anaesthetize 实验材料 2#: 6#: 18#: 22#: e: Vestigial/残翅 三隐性(小翅、焦刚毛,白眼) Wild type/野生型 White eye/白眼 Ebony/黑檀体 * 毛笔16支、小烧杯8支,玻棒 4根, * / * / 课外:国内外利用果蝇开展了哪些实验研究?(国内外有哪些果蝇研究实验室?有哪些果蝇研究获得了诺贝尔奖?等等) * * * * 毛笔16支、小烧杯8支,玻棒 4根, * / * / 课外:国内外利用果蝇开展了哪些实验研究?(国内外有哪些果蝇研究实验室?有哪些果蝇研究获得了诺贝尔奖?等等) * * *
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