遗传学第六章预案.ppt

第五节 异常重组—原核生物转座子 转座子(transposon,Tn):基因组内不必借助于同源序列就能 改变自身位置的一端DNA序列. 异常: 转座、重组发生在非同源序列间，不 需RecA蛋白 一、原核生物中的转座子 1.插入序列（inserted sequence,IS)：长度在768-5700bp, 两端具几~几十bp的反向重复序列 含有Is的质粒经变性后形成柄环结构 当一个IS插入“靶”DNA后，其两端会出现一小段正向重复序列（约5-11个核苷酸对。 插入位点形成正向重复序列的机制 二、转座子： 大(2000-25000bp)，转座有关的基因,抗药性及其他基因，两端具相同或同源序列。如IR序列。 三、转座噬菌体：Mu噬菌体 与其他温和性噬菌体的差别：其基因组不论在进入裂解周期或处于溶源状态都可随机整合到宿主染色体的任何位置，且游离的和已整合的基因次序是相同的. 使宿主菌获得一定特性 Tn3的结构模式图 9.2.2 转座子（transposon，Tn） 转座子是一类复合性转座因子，它带有同转座无关的基因（如抗药性基因），转座子两端有反向或正向重复的IS。 Tn的转座过程： 第六节 异常重组——真核生物中的转座子 一、酵母菌的转座子： Ty系列，长度约6300bp，两端含有两个δ 正向重复序列，其插入酵母菌染色体后，受体出现5bp的正向重复序列。 二、果蝇的转座子 P因子：杂种不育 ORF0 ORF1 ORF2 ORF3，内含子1，2，3 P（母）x P（父）， M（母）x M（父）， P（母）x M（父）：F1正常； P（父）x M（母）： F1不正常 9.3 异常重组-真核生物的转座子 9.3.1 果蝇的P因子 全长P 因子： 2907bp，两端 33bp的IR，4个外显子， 在生殖细胞中编码有活性的转座酶，在体细胞中编码无活性的转座酶。 缺失型P因子： P因子中段缺失衍生物，长度为0.5~1.4kb ,依赖 全长P因子的转座酶才能转座。 果蝇P品系的基因组有30~50份 P因子拷贝，1/3为全长P因子。 由于P因子的转座而引起的果蝇的杂种发育障碍： P(♂) ×M(♀) →P因子转座，引起插入突变，染色体畸变 M(♂) ×M(♀)或M(♂) ×P(♀) →无生育障碍(卵细胞质中含有大量的无活性的转座酶，转座抑制元件)。 杂种发育障碍有效地将相互杂交的群体逐渐隔离开来，并在生殖细胞中引入新的突变，对物种形成有重要影响 无转座，后代可育 转座，后代劣育 无转座，后代可育 P因子与杂种劣育 三、玉米的转座子 1932年，美国玉米遗传学家B.McClintock发现玉米籽粒色斑不稳定遗传现象，于1951年，第一次提出转座因子的概念。 糊粉层颜色： A C R Pr I/Ds 花色素 颜色 红 紫 抑制因子 解离因子 I/Ds：解离因子 Ac：激活因子 DNA transposable element Ac和Ds位于玉米第9染色体短臂上的色素基因C附近;有Ac而没有Ds时，C基因正常表达，籽粒有色； 当Ac和Ds都存在时，部分细胞中Ds会引起染色体断裂而去除色素基因C的作用，同时由于Ac因子转座酶的作用在另一些细胞中Ds会切离转座，因而色素基因C仍能正常表达，籽粒表现为无色斑点（色底白斑）； 当Ac和Ds都存在，Ds插入到色素基因C时，由于Ac的影响Ds很不稳定，经常切离转座，从而籽粒表现为色素斑点（白底色班）； 只有Ds时，由于没有了Ac，也就没有了转座酶，Ds不能移动，根据其插入的位点不同表现为均色。 Ac和Ds的序列具有很高的同源性,表明Ds是Ac缺失后形成： Ac-Ds 作 用 机 理 ： 杂交实验： 第七节 转座机制与遗传学效应 1. 转座的机制： 以细菌中转座子Tn3为例,说明转座的一般过程 (1979年Sharpiro提出) : A. 切开： 转座酶识别受体的靶序列，在两条单链上均切开，形成粘性末端；识别自身的反向重复序列，在3‘端切开。 B. 连接：供体和受体结合形成不完整共联体，留下缺口。 C. 复制：DNA聚合酶补齐缺口，再连接形成完整的共联体，具有重复序列。 D. 重组：在特定位点进行重组，共联体分离：留下原来的转座子