EST文库构建原理和应用剖析.ppt

EST文库构建原理和应用 —— 目录： EST概述 EST序列原理 EST产生原因 EST的应用 展望 EST概述： 表达序列标签（expressed sequence tags,ESTs）是指从不同组织来源的cDNA序列，指的是一组cDNA的部分序列,一般长度为150~500bp,是由大规模随机挑取的cDNA克隆测序得到的组织或细胞基因组的表达序列标签。一个EST代表生物某一时期的某种组织或细胞的一个表达基因。 注：cDNA 为具有与某RNA链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementary DNA之缩写，或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链。 EST产生的原因： 1990年人类基因组计划 (HGP)及其它模式生物的基因组计划实施以来 ，人们对生物体生命现象的研究已不仅仅局限于局部某个或几个基 因，而是把目光投向整个基因组 ，从整体水平去考虑基因的存在 ，结构与功能，以及基因之 间的相互关系等.而如何快速、高效地从基因组中获取生物学信息，已成为一个急迫而富有挑战性的课题摆在我们面前 。 EST技术就是基于这种认识而发展起来 的，并成为基因组学研究的一个强有力的工具。 表达序列标签（expressed sequence tags,ESTs） EST的制备程序 某特异组织→总RNA的提取→Poly（A）+mRNA→cDNA→两端加接头→与λz