广东海洋大学微生物学考试.docVIP

绪论 ---刘晓良 科赫氏法则：1.在每一病例中都出现相同的微生物，且在健康者体内不存在；2.要从寄主分离出这样的微生物并在培养基中得到纯培养;3.用这种微生物的纯培养接种健康而敏感的寄主，同样的疾病会重复发生；4.从试验发病的寄主中能再度分离培养出这种微生物来。 曲颈瓶实验：巴斯德设计了一个既可允许空气自由进入容器又可阻止容器内肉汤“自然发生”生命（腐败）的简便、巧妙的曲颈瓶，通过实验证实了肉汤腐败产生大量细菌的原因只有接种了来自空气中的微生物“胚种”。 试述微生物的多样性。 ①.物种的多样性.生理代谢类型的多样性.代谢产物的多样性遗传基因的多样性,生态类型的多样性体积小，面积大体积小面积大最基本，因为一个小体积大面积系统，必然有一个巨大的营养物质吸收面、代谢废物的排泄面和环境信息的交换面，并由此而产生其余4 个共性；.吸收多，转化快；.生长旺，繁殖快；.适应强，易变异；.分布广，种类多。试图示G+和G-细菌细胞壁的主要构造，并简要说明其异同。 G+细菌与G-细菌的细胞壁都含肽聚糖和磷壁酸；不同的是含量的区别：如下表 成分 占细胞壁干重的% G+细菌 G-细菌 肽聚糖 含量很高含量很低（～） 磷壁酸 含量较高（﹤0） 无 类脂质 一般无（﹤2） 含量较高（20） 蛋白质 无 含量较高 G﹢菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高，乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，番红复染后呈红色。 由于革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的细胞壁结构和组成成分不同，因此再经沙黄等红色染料复染后，就能辨别G+菌和G-菌。 步骤： 初染：加草酸铵结晶紫一滴，约一分钟，水洗。 媒染：滴加碘液冲去残水，并覆盖约一分钟，水洗。 脱色：将载玻片上面的水甩净，并衬以白背景，用95％酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止，约20—30秒钟，立即用水冲净酒精。 复染：用番红液染1－2分钟，水洗。 镜检：干燥后，置油镜观察。革兰氏阴性菌呈红色，革兰氏阳性菌呈紫色。 3、注意事项：1、革兰氏染色成败的关键是酒精脱色 2、染色过程勿使染色液干涸3、选用幼龄的细菌。 拴菌实验P29 试对G-细菌的鞭毛和螺旋体的周质鞭毛在结构、着生方式和运动特点等方面作一比较。 结构 着生方式 运动特点 G-细菌的鞭毛 基体（有L环、P环、S-M环、C环），钩形鞘，鞭毛丝 周生 直线运动，运动速度慢 螺旋体的周质鞭毛 基体，钩形鞘，鞭毛丝 螺旋方式缠绕在螺旋体细胞的表面 快速旋转 如何初步判断并进一步验证某一细菌是否长有鞭毛？长有何种鞭毛以及鞭毛是如何着生的？ 初步判断：观察其菌落边缘是否光滑，若较粗糙，可能有鞭毛。 验证：电镜观察；鞭毛染色法，在光学显微镜下观察；半固体穿刺培养；从培养基上的菌落形态判断；对细菌在其悬滴标本或水浸片的运动特点观察。 弧菌、螺菌类普遍着生鞭毛；在杆菌中，假单细胞菌都长有端生鞭毛，其余的都有周生鞭毛或不长鞭毛；球菌一般无鞭毛，仅个别属才长有鞭毛。 鞭毛的着生方式一般有：一端生；两端生；周生；侧生。 什么是菌落？试讨论微生物的细胞形态与菌落形态间的相关性及其内在原因。 菌落即单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、 有一定形态结构的子细胞生长群体。 因不同形态、生理类型的细菌，在其菌落形态、构造等特征上也有许多明显的反映，故细菌的细胞形态与菌落形态间存在明显的相关性现象，如，无鞭毛、不能运动的细菌尤其是球菌通常都形成较小、较厚、边缘圆整的半球状菌落；长有鞭毛、运动能力强的细菌一般形成而平坦、边缘多缺刻、不规则的菌落；有糖被的细菌，会长出大型、透明、蛋清状的菌落；有芽孢的细菌往往长出外观粗糙、“干燥”、不透明且表面多褶的菌落等等。也叫微生物蛋白，是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。所含的营养物质极为丰富。酵母菌进行出芽生殖时，子母细胞不立即分离而以狭小的面积相连，则称这种藕节状的细胞串为假菌丝。丝，真菌菌丝某处生出特殊形态的菌丝体或菌丝的变态物，伸入寄主体内吸取养分，这些变态物叫吸器。细菌鞭毛包括三个部分：基体，钩型鞘，鞭毛丝。其中基体含4个盘状物，从外到内分别为L环P环S环M环，其中SM环连在一起，相当于马达转子，他的外侧有Mot蛋白包围作为定子。Mot蛋白蛋白中的跨膜质子通道引导膜外质子流入膜内，从而驱动SM环快速旋转。钩型鞘用于连接鞭毛丝和基体，它可以360°旋转，使鞭毛加大运动幅度。鞭毛丝由鞭毛蛋白构成，含有中央孔道，鞭毛蛋白通过中央孔道在其游离端（顶部）进行装配成鞭毛丝。 真核