第十一章干细胞分化讲述.ppt

第十一章 干细胞分化 干细胞分化 在多细胞生物体的每一个体细胞中，遗传物质的组成是相同的。然而，在不同类型的细胞中，其基因的表达模式并不完全相同。在某一特定类型细胞中，某些基因处于活跃表达状态，而另一些基因处于沉默状态;在另一种不同类型的细胞中，基因表达的种类、数量及程度与前一种类型的细胞可能存在极大的差异。 在多细胞生物体通过细胞增殖使细胞数目不断增多的过程中，伴随着细胞的分化，即产生多种类型的细胞。细胞分化是不同细胞中基因表达模式不同的结果。 干细胞分化 胚胎干细胞的分化 成体干细胞的分化 （1）造血干细胞的分化 （2）神经干细胞的分化 （3）肌肉干细胞的分化 胚胎干细胞的分化 高等哺乳动物个体是由一枚受精卵发育而来的。早期胚胎(4-细胞及以前的胚胎)中的每一个卵裂球都具有发育的全能性( totipotent)，即一个卵裂球就具有发育为一个完整个体的能力。随着发育的进行，胚胎中的细胞数目不断增多，细胞的多潜能性也在逐渐丧失。 胚胎干细胞的分化 当胚胎发育到囊胚(blastula)阶段，其中的细胞已分为两大类，位于外围的细胞被称为滋养层细胞( trophoblast)，这部分细胞将发育为胎盘；位于滋养层内部的细胞团被称为内细胞团(inner cell mass， ICM)，这部分细胞将发育为胎儿。 胚胎干细胞的分化 细胞发育潜能的逐渐丧失可以形象地比喻为一个小球沿着山坡向下滚动，小球所具有的势能看做是细胞的发育潜能，被标注在图的左侧；这一期间细胞中的表现遗传修饰状态标注在图的右侧。 胚胎干细胞的分化 维持ES细胞多潜能性的表现遗传修饰 所谓的ES细胞，是指ICM经体外培养后，所形成的具有自我更新及多分化潜能( pluripotent)的细胞。 ES细胞主要通过多种类型的表现遗传修饰维持其多潜能性，这些表观遗传修饰类型包括DNA甲基化、组蛋白修饰、组蛋白变体、ATP依赖的染色质重塑以及RNA干扰(RNA interference， RNAi)等。 胚胎干细胞的分化 ES细胞与已分化的体细胞在染色质结构方面存在极大的差异，这种结构的差异化正是不观遗传修饰的结果。 （1）在ES细胞的基因组中，常染色质( euchromatin)的区域大于体细胞中的常染色质域。 （2）与体细胞的染色质相比， ES细胞的染色质呈现出一种更为松散的状态。 这种松散的态意味着DNA与组蛋白八聚体的结合并不是非常僵硬、死板，也就是染色质呈现为一种超动态(hyperdynamic)的结构。超动态染色质(hyperdynamic chromatin)被认为是ES细胞基因组具有可塑性的原因。 胚胎干细胞的分化 （3）ES细胞基因组中具有较多的组蛋白乙酷化修饰及组蛋白H3赖氨酸4甲基化修饰(H3K4me);具有较少的组蛋白H3赖氨酸9三甲基化修饰(H3K9me3) 。 对于ES细胞抑制发育、分化相关基因表达的问题有至少两种观点。 第一种观点认为， ES细胞采用26S蛋白酶体(proteasome)移除发育、分化相关基因启动子上的PIC(例如RNA聚合酶E及基因特异性的转录因子等)，从而阻止这些基因的表达。 另一种观点就是染色质双向(bivalent)区域机制。 胚胎干细胞的分化 （4）在ES细胞的基因组中，重要的发育相关转录因子的启动子区域既富含有组蛋白H3赖氨酸27甲基化修饰(H3K27me)，又富含有H3K4me修饰。 ES细胞可以采用染色质的双向区域调控发育、分化相关基因的表达。在ES细胞中，染色质的双向区域可以使发育、分化相关转录因子基因的表达维持在一个较低的水平，但允许这些基因预期的活跃表达。 染色质双向区域就像一个双向开关一样，可以灵活、有效地调控基因的表达和沉默。虽然染色质双向区域理论是一个被人们广泛认同的、有关m细胞调控基因表达模式的理论，但某些基因的启动子区域不具有双向区域。 胚胎干细胞的分化 （5）尽管ES细胞中可以高水平地表达DNA从头甲基转移酶(de novo DNA methyltransferase的，但ES细胞基因组范围内的DNA甲基化水平低于体细胞基因组范围内的DNA甲基化水平。 ES细胞与体细胞在DNA甲基化修饰方面还存在另一个差异，即前者会对非CpG二核昔酸的某些胞嘈院进行甲基化修饰。 胚胎干细胞的分化 胚胎干细胞的分化 细胞分化过程中的表观遗传修饰机理 人们可观察到的ES细胞分化事件包括多潜能性的降低甚至丧失以及三个原始生殖层(primordial germ layer)的形成。但在这些可观察到的事件发生之前， ES细胞中一定发生了大量基因表达改变的事件。 其原因在于：一方面这些事件持续的时间太为短暂，采用我们目前的技术还无法检测； 另一方面当这些早期事件发生时，ES细胞在形态及特征方面还未发生改