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原核生物和真核生物基因转录的差异 二、启动子 1 -10区,保守序列为 TATAAT。 Pribnow 框是RNA聚合酶的牢固结合位点,并且是解旋的重要部位,简称结合位点。 -35区,保守序列为TTGACA。 Sextama 框是RNA聚合酶中 σ 的识别位点,也是RNA聚合酶的初始结合位点。 RNA酶与启动子的相互作用 提供转录终止信号的序列称为终止子(terminator)。 终止信号存在于RNA聚合酶已经转录过的序列之中。 原核生物终止子分为两类: 一类是不依赖于ρ因子的转录终止(内在终止子); 一类是依赖ρ因子的转录终止; 两类终止子有共同的序列特征: 在转录终止点之前有一段间断的回文结构。 两类终止子碱基组成的不同点: 不依赖ρ因子 回文结构富含G-C 下游富含A-T 依赖ρ因子 G-C含量较少 下游无特征 依赖ρ因子的转录终止 非依赖ρ因子的转录终止 小结 概念 转录、逆转录、启动子、反义链、有义链、核心启动子、 RNA聚合酶结构与功能,各亚基的性质和功能。 原核生物转录的过程。 RNApol (?2???ω?) - DNA - pppGpN- OH 3? 转录起始复合物: 5?-pppG -OH + NTP ? 5?-pppGpN - OH 3? + ppi 5. 在RNA聚合酶β亚基催化下形成第一个磷酸二酯键,形成三元复合物(模板-酶-RNA)。 6. 当三元复合物中RNA长6~9个核苷酸时,?因子 从全酶解离下来,进入延长阶段。 RNA聚合酶有两个核苷酸结合位点: 一个是起始核苷酸位点;一个是延长核苷酸位点。 一般只有嘌呤核苷酸填充了起始位点,才能形成 第一个磷酸二酯键。 RNA合成的第一个核苷酸总有GTP或ATP,以GTP常见,此时?因子从全酶解离下来,靠核心酶在DNA链上向下游滑动,而脱落的?因子与另一个核心酶结合成全酶反复利用。 1. ?亚基脱落,RNA聚合酶核心酶变构,与模板结合松弛,沿着DNA模板前移; 2. 在核心酶作用下,NTP不断聚合,RNA链不断延长。 3. 碱基配对原则:A-U,T-A,G-C 4. 延长中的转录复合物也叫转录泡。随着RNA 聚合酶前移,转录产物RNA不断移出转录泡, 已转录完毕的DNA双链又重新复合而不再打开。 5. 原核生物的转录和翻译偶联进行。 (NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi 原核生物RNA转录的延长过程 原核生物转录过程中的羽毛状现象 5? 3? DNA 核糖体 RNA RNA聚合酶 (4)转录的终止和新生RNA链的释放 指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进,转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 分类 依赖 ρ因子的转录终止 1969年,Roberts发现了能控制转录终止的蛋白质,即ρ因子。 它由相同的6个亚基组成六聚体,分子量200kD。 ρ因子具有NTP酶活性和解螺旋酶活性,是促使转录三元复合物解离的根本原因。ρ因子的NTP酶活性依赖于单链RNA的结构。 ρ因子依赖性终止子含有一个反向重复序列,使 RNA末端形成一个发夹结构,导致转录延宕,ρ因子得以发挥作用,终止转录。 图 6-8 * 第七章 RNA的转录合成 主讲:陈友 琼州学院生物科学与技术学院 执行生命功能、表现生命特征的主要物质是蛋白质分子。DNA贮存着决定生物特征的遗传信息,只有通过蛋白质才能表达出它的生命意义,直接决定蛋白质合成及蛋白质特征的不是RNA而是DNA,因而人们确定DNA是遗传信息贮存者后就推测DNA是通过RNA去决定蛋白质合成的。50年代末RNA聚合酶的发现开始证实了这一推测。 以DNA为模板合成RNA的过程称为转录(transcription)。转录是生物界RNA合成的主要方式,是遗传信息即DNA向RNA传递过程,也是基因表达的开始。转录也是一种酶促的核苷酸聚合过程,所需的酶叫做依赖DNA的RNA聚合酶(DDRP)。转录产生初级转录物为RNA前体,它们必须经过加工过程变为成熟的RNA,才能表现其生物活性。 RNA所携带的遗传信息也可用于指导RNA的合成,即RNA的复制,或称为逆转录。 DNA转录的基本过程 主 要 内 容 RNA转录的概述 启动子的结构与功能 细菌的RNA聚合酶 真核和原核细胞内都存在有DDRP,迄今发现的DDRP的有以下特点:①以DNA为模板: 在DNA的两条多苷酸链中只有其中一条链作为模板,这条链叫做模板链,又叫反义链。DNA双链中另一条不做为模板的链叫做编码链,又叫有意义链,编码链的的序列与转录本RN
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