第三章+基因突变说课.pptVIP

第三章 工业微生物诱变育种 一、基因突变的分类 四、基因符号表示 命名规则： 1.根据基因产物或其作用产物的英文名称的第一个字母缩写成3 个小写斜体字母来表示。 2.不同的基因座，其中任何一个突变所产生的表型变化可能相同，其表示方法是在3 个小写斜体字母后加上一个斜体大写字母来表示区别。如Recombination→recA、recB、recC 一个细菌分裂一次产生两个细菌，两个细菌再经一次分裂产生四个细菌，这时一个细菌开始总共经历了三个世代。细菌繁殖过程中的世代总数为细菌数减1.如果细菌总数和开始时的细菌总数相差很大，可以认为细菌总数就是世代数。 突变率＝（M2-M1）/(N2-N1)，其中M为抗性菌落数；N为不同时间的细菌数。 突变的特点 突变不完全是个随机的过程 突变热点 (hotspots of mutation） 从理论上讲，DNA分子上每一个碱基都可能发生突变，但实际上突变部位并非完全随机分布。DNA分子上的各个部分有着不同的突变频率，即DNA分子某些部位的突变频率大大高于平均数，这些部位就称为突变热点无论是自发还是诱发突变中都有热点存在。 突变热点产生的原因 5－甲基胞嘧啶（MeC）的存在，MeC脱氨氧化后生成T，引起G－MeC→A-T转换；短的连续重复顺序处容易发生插入或缺失突变；有的与突变剂种类有关，如DNA顺序中某个碱基对突变剂更敏感，有的则相反。 相邻碱基对的影响： CAA CAG 谷氨酰胺 ↑ ↑ 3倍 赭石 UAA → UAG 琥珀 ↓ ↓ 33倍 乳石UGA UGG 第二节 诱变剂与突变机制 诱变剂：能使突变率提高到自发突变水平以上的物理、化学和生物因素。 诱变机制： 碱基置换可以分为两类：转换和颠换前者是嘌呤到嘌呤，嘧啶到嘧啶的变化，后者是嘌呤到嘧啶或嘧啶到嘌呤的变化。 碱基类似物——5BrU的诱变机理和该假设的证明 d.交联：烷化剂有两类，一类是单功能基烷化剂，如甲基甲烷碘酸，只能使一个位点烷基化；另一类是以双功能基烷化剂，化学武器如氮芥、硫芥等，一些抗癌药物如环磷酰胺、苯丁酸氮芥、丝裂霉素等，某些致癌物如二乙基亚硝胺等均属此类，其两个功能基可同时使两处烷基化，结果就能造成DNA链内、DNA链间，以及DNA与蛋白质间的交联。 移码突变 定义： DNA分子中一对或少数几对核苷酸的增加和缺失造成的基因突变。 引起移码突变的诱变剂： 如吖啶橙，原黄素，吖黄素，可掺入DNA的碱基对之间，引起DNA双链错位 移码突变机制： UV照射形成嘧啶二聚体 激光诱变 第三节 突变体的形成 一、诱变剂与DNA接触之前：与细胞通透性、细胞壁成分是否反应等有关。 二、突变发生过程： ① 与DNA是否处于复制状态有密切关系。如营养缺陷性菌株在诱变时加入菌株缺乏的氨基酸，诱变效果增强。 ② 会受到多种酶的影响。 三、突变体的形成 形成的突变需经过突变后的修复，保留下来的才行。 第四节 DNA损伤的修复 1.光复活修复 类似的修复酶广泛存在于动植物中，人体细胞中也有发现 修复DNA损伤最为普遍的方式，对多种DNA损伤包括碱基脱落形成的无碱基位点、嘧啶二聚体、碱基烷基化、单链断裂等都能起修复作用。 这种修复方式普遍存在于各种生物细胞中，也是人体细胞主要的DNA修复机制。 主要有两种形式 3.重组修复(Recombination Repair) 某些情况下没有互补链可以直接利用，例如在DNA复制进行时发生DNA损伤，此时DNA两条链已经分开，其修复可用重组方式： ①受损伤的DNA链复制时，产生的子代DNA在损伤的对应部位出现缺口。 ②另一条母链DNA与有缺口的子链DNA进行重组交换，将母链DNA上相应的片段填补子链缺口处，而母链DNA出现缺口。③以另一条子链DNA为模板，经DNA聚合酶催化合成一新DNA片段填补母链DNA的缺口，最后由DNA连接酶连接，完成修补。 　　 4 DNA聚合酶的校读作用 作用：校正DNA复制过程中出现的差错。 参与反应的酶： ①DNA聚合酶ⅠⅡⅢ 5′→3′聚合酶活性 3′→5′外切核酸酶活性 5′→3′外切核酸酶活性（ DNA聚合酶Ⅰ） ②尿嘧啶-N-糖苷酶：切除U 　　当DNA两条链的损伤邻近时，损伤不能被切除修复或重组修复，这时在核酸内切酶、外切酶的作用下造成损伤处的DNA链空缺，再由损伤诱导产生的一整套的特殊DNA聚合酶──SOS修复酶类，催化空缺部位DNA的合