褪黑素对体外培养的脐静脉内皮细胞增殖与凋亡的影响.pdf

中国医学科学院中国协和医科大学博士论文 中国医学科学院中国协和医科大学博士论文 中文摘要 褪黑素对体外培养的脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响 目的：第一部分；为了探讨褪黑素(MEL)在血管新生方面的作用和可能的抗肿瘤血 增殖和凋亡的影响。第二部分：在第一部分基础上，探讨高浓度MEL抑制HUVECs 增殖和促其凋亡的可能细胞信号传导通路。 方法：第一部分：原代培养HUVECs，免疫磁珠筛选后，并用免疫组化和电镜鉴定内 H17vECs细胞周期和细胞凋亡情况；免疫荧光、Western 以及PKC激活剂PMA和抑制剂GF 增殖和相关细胞信号传递通路的影响。 结果：第一部分：(1)成功的分离培养原代HUVECs，免疫磁珠筛选后能继续贴壁生 长并传代，倒置显微镜下HUVECs呈鹅卵石状，VIII因子内皮细胞细胞免疫化学着棕 增殖， 并有浓度依赖倾向，lmmol／L抑制作用最明显。(3)流式细胞仪显示高浓度 MEL能明显阻滞HUVECs细胞周期，能阻止细胞进入S期，引起“S期停滞”；凋亡 6 中国医学科学院中国协和医科大学博士论文 Western 白表