大鼠缺血模型重点介绍.pptxVIP

大鼠脑缺血模型 脑缺血的概述 脑缺血是一种常见病，已成为引起人类死亡的第三大原因。 引起脑缺血的原因很多。 脑缺血可导致许多病理生理改变。 建立脑缺血模型的意义 宗旨: 为人类疾病（脑缺血性疾病）研究服务 要求: 基因 脑和血管解剖 繁殖力强 操作简单，重复性好 尽管一些体积较大的动物，如猩猩、猴、猫、狗、兔、猪 都曾用于脑缺血研究，但是大多数实验室选择大鼠或沙土鼠作为研究对象。 大鼠和小鼠的优势 大鼠品种多，易于饲养，价格低廉 纯种鼠属近亲交配，基因型相似，脑血管解剖和生理机能也相似 大鼠脑血管解剖和生理机能接近于人类 脑血管损伤部位恒定，实验重复性好 动物存活时间长，利于脑缺血相关病理改变过程的研究 脑体积大小适宜，易施低温固定技术和组织生化分析 有关系列大鼠的生理、药理和生化方面的实验资料可供分析比较 克服了体外实验无法实施再灌流的缺陷 沙土鼠缺乏后交通动脉及完整的基底动脉环，两侧大脑供血相对独立，通过闭塞一侧或双侧CCA即可复制效果明显的同侧或双侧脑缺血模型 脑缺血模型的发展 1986年，Koizumi等首先采用血管内栓塞堵塞脑中动脉开口建立大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO)。 1989年，Longa等采用血管内栓线阻塞法制备该模型。 之后发展起来的还有双侧颈总动脉结扎法、开颅机械闭塞法、微栓子栓塞阻断法、化学刺激诱导血栓性闭塞法、光化学诱导血栓形成法等。 综合考虑操作难易度以及缺血效果等方面因素，运用最为广泛的是血管内栓线法。 大鼠脑血管解剖示意图 脑缺血模型的制备 ｝ 大鼠局灶性脑缺血（MCAO）模型 　大脑中动脉( MCA)是人群脑卒中的多发部位，MCA闭塞（Middle cerebral artery occlusion， MCAO）模型被普遍认为是局灶性脑缺血的标准动物模型，主要有以下几种：开颅法、光学法、栓塞法、栓线法。 开颅法 麻醉动物，耳眼连线的中点垂直切开皮肤，通过钝性分离颞肌，开颅后暴露MCA，用电凝器横过嗅束旁的MCA使其凝闭，用10号手术丝线结扎MCA，造成MCA支配区局灶性脑缺血模型。 优点：实验条件恒定，缺血效果可靠，全身影响小，局部条件可控制。 缺点：需要开颅，创伤大，易感染。 光学法 将大鼠头部固定于立体定位仪上，切开皮肤，暴露颅骨，静脉注射光敏材料虎红酸钠，用特定冷光源(500--600nm)照射切口处颅骨，光线透过颅骨与血管内的光敏物质接触，激发光化学反应而产生单线态氧，直接损伤血管内皮细胞而诱导血栓形成。 优点：不开颅，手术创伤小，动物易长时间存活，血栓形成过程与人类近似，适用于抗血小板、抗血栓及内皮细胞保护药物的急慢性动物实验研究。 缺点：较早地导致终未动脉及微血管永久性闭塞，不利于扩血管及促进侧支循环作用的研究 栓塞法 麻醉动物，将无菌干燥研碎筛滤的血凝块、碳素颗粒、塑料颗粒、花生四烯酸盐等作为栓塞剂，由颈外动脉注入栓子后结扎，开放CCA，栓子由颈内动脉(ICA)进入MCA，造成以MCA供血区脑组织损伤为主的缺血模型。 优点：不用开颅，操作较为简单。 缺点：无法预测栓塞部位与大小，脑组织缺血不一，不利于神经症状和脑组织定量分析。 栓线法 由 ECA 插入 4 -0 尼龙线进入 ICA , 阻断 MCA起始端而导致局灶性脑缺血。通过提拉插线可以造成再灌流损伤模型。 优点：该法手术创伤小, 动物易长时间存活血栓形成过程与人类相似可选择皮层梗塞部位 缺点：较早地导致终末动脉及微血管永久性闭塞 ,不利于扩血管及促进侧支循环作用的研究 大鼠局灶性脑缺血模型 　 模型制备的影响因素 麻醉药 : 种类、剂量、给药途径呼吸、心率影响 梗死时间 : 0.5-24h 脑温: 常温37℃、亚低温30-34℃ 血糖: 可加重脑损伤，增加梗塞面积1.4倍 血压: 脑血流量下降明显,梗塞体积大 Summary 选择: 各种脑缺血动物模型的制备方法各有优缺点, 研究者应根据实验目的及研究方向做出相应的选择 进展: 转基因小鼠的出现 , 超声、MR、MRA、介入等新技术的发展及其在模型制备中的应用 , 在很大程度上促进了脑缺血模型的研究 问题: 如怎样更好地控制脑梗死灶的部位和范围 , 更准确地控制缺血和再灌注时间等 展望: 脑缺血动物模型的日趋完善 , 将为人们更深刻认识I CVD发病机制 , 研究新的治疗对策等提供更准确的信息 谢 谢