禽病病原之实验室检测方法20140425教程.pptxVIP

禽病病原之实验室检测方法;成立于2011年，是集动物疫病诊断、研究和服务为一体的技术服务窗口。 通过检测服务，对畜禽健康水平和疫病状态进行全面科学系统的分析评估，指导养殖客户做好科学防疫和用药工作，建立推广“免疫+用药+监测+净化+生物安全管理”的全新方案式兽医服务模式。 ;与宾夕法尼亚州立兽医诊断中心联合成立“中美动物诊断服务中心”，与“中国科学院海洋研究所、中国农业科学院兰州兽医研究所、中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所、国家生化工程技术研究中心（上海）和国家兽用生物制品工程技术研究中心等5家单位签约形成战略合作。实现了技术服务升级；积极探索、实施与规模化养殖企业建立“战略合作”，实现“产业链共赢”。 ;;瑞普技术服务体系;;;四大特点;先进的仪器设备;先进的仪器设备;先进的仪器设备;先进的仪器设备;先进的仪器设备;先进的仪器设备;先进的设备;标准的操作程序;;;;;4月9日晚间消息，国内民营预防医疗服务提供机构爱康国宾正式在纳斯达克挂牌上市。成为国内首家健康体检赴美IPO上市企业。 ;健康养殖的现状;病原的多方面威胁;禽病病原检测内容;病原检测流程;样品的采集与运输;;以IBV为例;;采样工具;IBV病料采集;IBV病料采集; 咽喉、腭裂、泄殖腔棉拭子采集方法如下：取咽喉拭子时将拭子深入喉头口及上颚裂来回刮3～5次取咽喉分泌液；取泄殖腔拭子时将拭子深入泄殖腔并沾取少量粪便。将棉拭子浸入分装有生理盐水的离心管，折断超出部分，盖紧，并送实验室检测。;组织样品的保存;最终原则就是选择较厚的泡沫盒，同时多放冰块。;病料检测前处理;;;小结;PCR检测技术;PCR技术;PCR原理;2014/4/25;以IBV为例;抽提IBV RNA;抽提IBV RNA;提取RNA时需要注意的问题;RT-PCR反应（40ul体系）;;PCR材料与程序;PCR的反应体系;PCR检测中的常见问题;PCR产物的凝胶电泳和回收;IBV凝胶成像;PCR检测中的常见问题;PCR检测中的常见问题;PCR检测中的常见问题;IBV结果判定;IBV测序结果分析;其他病原;DNA抽提方法;瑞普诊断中心PCR检测核酸的优势技术;瑞普诊断中心PCR检测核酸的优势技术;PCR检测核酸的优点及局限性;;IBV、NDV、AIV-H9流行变化趋势;核酸检测的后续分析;禽原病毒分离;实验室常用的病毒分离方法;鸡胚接种法检测病原;病料接种鸡胚的原则;病毒;;;用SPF鸡胚，至少使用白壳非免胚。 孵化时一般选择相对湿度为60%，最低温度36℃，一般37.5℃。每日翻蛋最少3次，大头朝上，注意鸡胚位置 孵化3-4天照蛋时，如果鸡胚正常可见清晰的血管及胎动，血管分支明显；去除死胚、无精胚。;鸡胚的选择;IBV病料的处理和接种准备;IBV鸡胚接种方式;IBV鸡胚接种方式;IBV接胚结果;绒尿膜接种-人工气室法;卵黄囊接种;;NDV;AIV-H9;AIV-H5;病毒扩繁后鉴定;鸡胚接种检测;建立种毒库;瑞普诊断中心生物毒种档案记录;总结;