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第七章 亲和层析 一般用于纯化蛋白质和核酸等大分子物质的方法的主要依据是各种大分子物质之间理化特性的差异性。 缺点： 由于这种差异性较小，因此要得到一种纯度稍高的物质，常常需要繁琐的操作，经历较长的时间，但最终收得率却甚低。 1967年Axen等 用溴化氰活化多糖凝胶偶联肽和蛋白质的方法，并成功地制备了固定化酶。 这种利用大分子物质具有的特异的生物学性质进行纯化的方法，于20世纪70年代就有了惊人的发展，并逐步得到了广泛的应用。 这使酶类等大分子物质的纯化过程变得较简单、迅速和高效(见表7-1)。 第一节 基本原理 M-L-S复合物 欲分离的大分子物质S 与相对应的专一物质L(配体)以次级键结合（亲和力）， 能生成一种可解离的络合物L-S， 其中的L又能与活化的基质M以共价键首先结合， 而形成M-L-S复合物。 亲和吸附剂 配体L以共价键的方式固化到含有活化基团的基质M上，制成亲和吸附剂M-L，或者叫做固相载体。 亲和层析法 根据L-S之间能可逆地结合与解离的原理发展起来的层析方法，称为亲和层析法(affinity chromatography)。 亲和层析的原理(见图7-1)： 每对反应物之间都有一定的亲和力。 正如在酶与底物的反应中，特异的底物(S’)才能和一