实用-第8次课ppt.ppt

早在1959年，就发展了免疫铁蛋白技术。免疫铁蛋白是一种含二价铁离子(Fe2+)的蛋白质，单体分子量445000D，含铁量23％。一般常从马的脾脏中提取铁蛋白。铁蛋白的外壳直径100～120nm，内含直径55～60nm的铁胶粒核心，而胶粒内有2000～3000个铁原子。这些铁原子分布于四个区域内，各组成一个圆形的密集区，使之成为电子致密物。免疫铁蛋白技术适于研究悬浮液、细胞表面、细胞内的抗原的定性或定位，如：病毒、细菌、红血球、腹水癌细胞和淋巴细胞等抗原的定位等，还可用于病理学中研究抗体的形成及其在细胞内的定位等。但由于铁蛋白的分子量较大，更适于研究表面抗原的定性与定位。 （1）免疫铁蛋白的反应机制 1)直接法：这种方法比较简单，是把样品直接浸泡 在标记的抗体中，抗原抗体发生免疫结合反应。 在一定条件下使 2)间接法：间接法比较复杂，但有一定的优势，如： 用铁蛋白标记的羊抗兔抗体可做多种抗原的兔抗 血清实验，因此能提高工作效率。而且敏感性也 比较强，所以更常用。铁蛋白间接免疫反应的机 制如图所示。 免疫铁蛋白技术分为直接法和间接法。 铁蛋白 二抗 抗原 一抗 样品 免疫酶反应以酶作为一抗或二抗的标记物，形成一抗—酶复合物或二抗—酶复合物，然后直接或间接与抗原作用，形成水不溶性免疫复合物，再与适宜的底物作用，生成电子致密的