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- 2016-07-01 发布于湖北
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2-1章 分子克隆载体分析.ppt
第二章 分子克隆载体 第一节 分子克隆载体的特点 分子克隆载体的功能: 为外源基因提供进入受体细胞的转移能力 为外源基因提供在受体细胞的复制能力或整合能力 为外源基因提供在受体细胞中的扩增和表达能力 三种表达型载体结构图 显然, 不同类型载体中所缺少的部分必须由外源基因提供。换言之,被表达的外源基因一旦确定, 表达载体的类型也就确定了。 例子:pTrcHis2和pPIC9K 4) 用途: a. 表达外源基因以产生大量外源基因产物 b. 用于构建cDNA文库 5)??注意事项: a. 启动子来源 b. 终止子来源 c.?启动子的启动效率 d.信号肽来源与结构 e. 调控类型 * * 分子克隆载体是一类可供外源DNA插入并携带重组DNA分子进入适当宿主细胞的DNA分子。 一、发展概况 1.??第一阶段(1977年前):天然质粒和重组质粒的利用,如pSC101, colE1, pCR, pBR313和pBR322 (1977, Bolivar et al) 2.??第二阶段:增大载体容量(降低载体长度),建立多克隆位点区和新的遗传标记基因。如pUC系列载体。 3.第三阶
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