Tan第四章目的基因的制备课程.ppt

欢迎同学们听课！ 欢迎研究生听课！ 本课程内容 第一章 绪论 第二章 基因克隆的工具酶 第三章 基因工程的载体 第四章 目的基因的制备 第五章 目的基因导入和重组子的筛选 第六章 外源基因的表达 第七章 基因操作的基本技术 第八章 植物基因工程及应用 第九章 动物基因工程及应用 第十章 医学基因工程及应用 第四章 目的基因的制备 目的基因（target gene） 是指已被或欲被分离、改造、扩增和表达的特定基因或DNA片段。 是编码某一产物与某些性状相关的基因 本章分两节 4.1 目的基因的制备方法 4.2 克隆基因的分离 4.1 目的基因的制备方法 4.1.1 直接分离法 4.1.2 构建基因文库分离法 4.1.3 PCR法 4.1.4 化学合成法 克隆基因的方法有很多，根据研究基础的不同，可以使用以下的方法克隆目的基因： 1. PCR或RT-PCR法2. 从基因文库中分离基因3. 从cDNA文库中分离基因4. 转座子标签法5. 图位克隆法6. 差减杂交法、扣除杂交、差异显示法7. 人工合成法本章中主要介绍从基因文库中筛选目的基因的几种方法。获得目的克隆的方法有两种1） 目的基因的直接选择2） 从基因文库中筛选 4.1.1 直接分离法 直接选择的基因比较少，如抗生素抗性基因。如克隆一个kan抗性基因，在R6-5质粒上含有四种抗性基因：kan,