3,5—二硝基水杨酸法测定还原糖分析.pptVIP

还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及产物，3，5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的 3-氨基-5-硝基水杨酸。 在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计在 540nm 波长下测定光密度值查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。 3，5—二硝基水杨酸法测定还原糖 掌握还原糖定量测定的原理和方法 。 掌握分光光度计的使用。 一、实 验 目 的 还原糖的测定是糖的定量测定的基本方法。 还原糖是指含有自由醛基和酮基的糖类。 单糖均为还原性糖，双糖不一定是还原性糖，其中乳糖和麦芽糖为还原性糖，蔗糖和淀粉为非还原性糖。 利用糖的溶解度不同，可将样品中的单糖、双糖、多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定。再分别求出样品中还原糖和总糖的含量。 二、实验原理 二、实验原理 （一）仪器 小麦面粉、pH 试纸、容量瓶、玻璃漏斗、移液管、量筒、试管、沸水浴锅 （二）试剂 （1）6mol/l HCl 和 6mol/l NaOH溶液 （2）1mg/ml葡萄糖溶液 准确称取 80℃烘干恒重的分析纯葡萄糖 0.1g，置于小烧杯中加入少量蒸馏水溶解后，移到 100ml 容量瓶中，用蒸馏水定溶至 100ml，混匀，4℃冰箱中保存备用。 三、试剂与仪器 （