第2章蛋白质测序、分离及提纯分析.pptVIP

2.6.2 蛋白质的胶体性质 蛋白质的沉淀 Pr从胶体溶液中析出 Ⅰ可逆沉淀： 温和条件，改变溶液pH或Pr所带电荷 Pr结构和性质没有变化 适当条件下可重新溶解 ——非变性沉淀 pI沉淀法、盐析法和有机溶剂沉淀法等 不可逆沉淀 强烈沉淀条件 破坏Pr胶体溶液稳定性 也破坏Pr结构和性质 沉淀不能再重新溶解 ——变性沉淀 如加热沉淀、强酸/碱沉淀、重金属盐 和生物碱沉淀等 乙醛酸反应 在蛋白质溶液中加入乙醛酸，并沿试管壁慢慢注入浓硫酸，在两层之间就会出现紫色环，凡含有吲哚基的化合物都有这一反应。 坂口反应 精氨酸分子中含有脈基，能与次氯酸钠（或次溴酸钠）及ɑ-萘酚在氢氧化钠溶液中产生红色产物。此反应可以用来鉴定含有精氨酸的蛋白质。 米伦反应 米伦试剂为硝酸汞、亚硝酸汞、硝酸和亚硝酸的混合液，蛋白质溶液加入米伦试剂后即产生白色沉淀，加热后沉淀变成红色。酚类公化合物有此反应。 紫外吸收 蛋白质分子中含有色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸残基，这些氨基酸的侧链基团具有紫外光吸收能力，最大吸收峰在在280nm 处，故通过对280nm 波长的紫外吸光度的测量可对蛋白质溶液进行定量分析。 2.7 蛋白质分离提纯及分析技术 2.7.1 蛋白质分子量及其确定方法 蛋白质相对分子量在6000～1 000 000之间。测定分子量的主要方法有化学组成法、