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- 2016-07-02 发布于安徽
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高中生物选修一速简笔记.doc
高中化学选修1速简笔记
适于加强记忆,配套课本使用
5.1 DNA粗提取、鉴定
1.1)DNA在0.1mol/LNaCl溶液中溶解度最大,2mol/L溶解度最小。
DNA不溶于酒精溶液,某些蛋白质能溶,进一步分离。
2)DNA在80oC以上变性,多数蛋白质不能忍受60~80oC。
洗涤剂瓦解细胞膜,对DNA无影响;蛋白酶水解蛋白质。
3)DNA、二苯胺,沸水浴,蓝色。
2.1)选取:DNA含量较高的生物组织。
2)动物:加蒸馏水,搅拌,过滤,收集滤液。
植物:切碎,加洗涤剂、食盐,搅拌研磨,过滤,收集滤液。
3)纯化DNA:①控制NaCl浓度:2mol/L,过滤不溶物质,0.14mol/L,析出DNA,过滤溶液中杂质,2mol/L,溶解DNA。直到丝状物不再增加为止。
②滤液中加嫩肉粉,木瓜蛋白酶。
③滤液60~75oC恒温水浴箱保温,严格控制温度范围。
4)析出鉴定:过滤,加与滤液体积相等、冷却的95%酒精溶液,静置,白色丝状物。
用玻璃棒沿一个方向搅拌卷起,滤纸吸去水分。
2mol/LNaCl溶液溶解,二苯胺试剂,混合均匀,沸水加热,冷却,变蓝。
3.1)血液,加柠檬酸钠,防止凝固。
2)加洗涤剂时,轻缓、柔和,否则容易产生大量泡沫。
加入酒精、搅拌,以免加剧DNA分子破裂,不能形成絮状沉淀。
3)二苯胺试剂现配现用:溶于冰醋酸,加浓硫酸,棕色瓶保存,临用前加2%乙醛溶液。
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