外源基因CXCR4转染对山羊骨髓间充质干细胞(BMSCs)生物学特性影响实验的研究.pdfVIP

摘要 摘 要 目的：本实验研究比较不同的方法对获取组织修复所需的种子细胞的影响， 探讨慢病毒载体携带外源基因转染BMSCs 后对细胞的生物学特性的影响 方法：用密度梯度离心法和全骨髓培养法分离提纯山羊骨髓间充质干细胞； 用流式细胞仪鉴定 BMSCs 的表面抗原标志物CD29、CD60L、CD44、CD45 ； 用茜素红染色、油红 “O ”染色、甲苯胺蓝染色分别检测外源基因CXCR4 转染 前后BMSCs 成骨、成脂、成软骨分化的潜能；用细胞增殖实验及流式细胞仪检 测外源基因转染后细胞生长情况的变化等 结果：两种方法均成功的提取出了BMSCs ；细胞表面标志物通过鉴定发现 CD29、CD44 属于高表达，而CD60L,CD45 低表达；外源基因成功转染BMSCs 之后实现了目的基因的高表达，细胞多向分化潜能仍然存在，BMSCs 活性及周 期未发生明显改变。 结论：我们研究结果表明外源基因转染BMSCs 在体外诱导下仍然具有多向 分化的潜能，外源基因转染BMSCs 后稳定高表达，在SDF-1 趋化作用下可以实 现细胞的迁移、归巢的目的。 关键词：山羊；间充质干细胞； CXCR4 基因；慢病毒转染