生物学热点问题(二).docVIP

生物学热点问题（一） 一、细胞工程　　细胞工程是指采用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过某种工程学手段，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。可分为植物细胞工程技术、动物细胞工程技术两大类。　　理论基础--细胞全能性：生物体的每一个细胞都包含该种生物所特有的全套遗传物质，都有发育成完整个体所必需的全部基因因而具有发育为完整个体的潜能，称为细胞的全能性。从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。在生物体内，细胞并没有表现出全能性，而是分化成为不同的细胞、器官，这是基因在特定的时间、空间条件下选择性表达的结果。 　　（1）科学研究表明，当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和其他外界的作用条件下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。　　①植物组织培养是植物细胞工程中比较成熟的技术。它是指植物细胞或组织、器官脱离了植物体后，在一定的外部因素作用下，经过细胞分裂形成愈伤组织（排列疏松、无规则、高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞群）从而由高度分化的状态转而脱分化，表现出全能性，由愈伤组织继续发育、分化，长成新的植株。可表示如下：　　　　　②植物体细胞杂交是用两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，并且把杂种细胞培育成新的植物体的方法。植物体细胞杂交的第一步就是去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体；然后利用物理的或化学的方法使不同植物体细胞的原生质体融合。得到的杂种细胞，用植物细胞培养的方法进行培育，可以得到杂种植株。科学家们最早将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出番茄马铃薯杂种植株。在20世纪后30牛里，科学家们利用植物体细胞杂交的方法，相继培育出了烟草等植物的种内杂种，以及烟草-海岛烟草、白菜-甘蓝、胡萝卜-羊角芹等有性杂交不亲和的种间或属间杂种。但目前这项技术还有许多理论和技术问题没有解决，仍处于研究阶段。　　（2）关于动物细胞工程，常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体、胚胎移植、核移植等，其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础。　　①动物细胞培养所用的培养细胞大多取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，将组织取出后先用胰蛋白酶等使组织分散成单个细胞，然后配成一定浓度的细胞悬浮液，将该悬浮液放入培养瓶中，在培养箱中培养，这个过程称为原代培养。细胞在培养瓶中贴壁培养，随着细胞的生长和增殖，细胞数量增多，需要定期地用胰蛋白酶使细胞从壁上脱离下来，配置成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中培养，这称为传代培养。动物细胞培养技术的应用是多方面的。许多有重要价值的蛋白质生物制品，如病毒苗、干扰素、单克隆抗体等，都可以借助于此项技术大规模生产。 　　②动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是相同的，诱导融合的方法类似，动物细胞的融合还常常用到灭活的病毒作为诱导剂。很多不同种类的动物细胞之间或动物与人的细胞之间都能进行融合，形成杂种细胞，例如：人-鼠、人-兔、人-鸡、人-蛙、鼠-鸡、鼠-兔、鼠-猴等的细胞都进行融合。动物细胞融合技术最重要的用途，是制备单克隆抗体。　　③单克隆抗体是指通过克隆，形成遗传物质完全相同的细胞群，这样的细胞群有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体，即单克隆抗体。该技术源于人们为了获得某种抗体，采用把相应抗原反复注射到动物体内然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这一方法获得的抗体产量低、特异性差、纯度低、反应不够灵敏。后来科学家发现动物体内的B淋巴淋巴细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。因此要想获得大量的单一抗体，必须用单个B淋巴细胞进行无性繁殖。但是在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限繁殖的。为解决这一问题，阿根廷科学家米尔斯坦（Cesar Milstein）和德国科学家柯勒（Georges Kohler）设计了一个极富创造力的实验方案，并因此于1984年获得了诺贝尔或生理学奖。他们想：如果用一种能在体外培养的融合细胞就能大量增值，产生足够量的特定抗体。根据这个设想，他们首先将抗原注射入小鼠体内，然后从小鼠脾脏中获得能够产生抗体的B淋巴细胞，与小鼠骨髓瘤细胞在灭活的仙台病毒或聚乙二醇的诱导下融合，再在特定的选择性培养基中筛选出杂交瘤细胞。由于杂交瘤细胞继承了双亲细胞的遗传物质，因此它不仅可以具有B淋巴细胞分泌抗体的能力，从中挑选出能够产生所需抗体的细胞群，继续培养，以获得足够数量的细胞，在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增值。这样，从细胞培养或小鼠的腹水中，就可以提取大量的单克隆抗体了。单克隆抗体的制备实验成功，不仅在生物学基础理论的研究中具有重要意义，而