生物制药工艺学总结重点剖析.pptVIP

基本概念 固定相：固定相是色谱的一个基质。它可以是固体物质（如吸附剂，凝胶，离子交换剂等），也可以是液体物质（如固定在硅胶或纤维素上的溶液），这些基质能与待分离的化合物进行可逆的吸附，溶解，交换等作用。 流动相：在色谱过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体等，都称为流动相。柱色谱中一般称为洗脱剂，薄层色谱时称为展层剂。 分类 根据分离的原理不同分类 气相色谱 吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 体积排阻色谱（凝胶色谱） 亲和色谱 纸色谱 根据固定相基质的形式分类 根据流动相的形式分类 薄层色谱 柱色谱 液相色谱 超临界流体色谱 按层析过程的机理分类 　　　名称 　　分离原理 吸附层析法 各组份在吸附剂表面吸附能力不同，固定相是固体吸附剂 分配层析法 各组份在流动相和静止液相（固相）中的分配系数不同 离子交换层析法 固定相是离子交换剂，各组份与离子交换剂亲和力不同 凝胶层析法 固定相是多孔凝胶，各组份的分子大小不同，因而在凝胶上受阻滞的程度不同 亲和层析法 固定相只能与一种待分离组份专一结合，以此和无亲和力的其它组份分离 记录器 (1) (2)泵 (3) (4) (5) adaptor reservoir A 梯度制造器 缓冲液 胶体 层析柱 胶体填装 监视器 分步收集器 层析系统的组成 层析的操作步骤 装置选择 上样和洗脱 结果检测 上样均一性 洗脱装置 目的不同 检测方法不同 活性检测 基质均匀性 柱层析的L/d比值 6、沉淀分离技术 盐析沉淀法 有机溶剂沉淀法 等电点沉淀法 非离子性聚合物沉淀法 成盐沉淀法 选择性变性沉淀法 7、结晶和重结晶技术 过饱和溶液的形成 冷却热饱和溶液 部分溶剂蒸发法 真空蒸发冷却法 盐析法 有机溶剂法 8、浓缩与干燥技术 浓缩 干燥 常压蒸发 减压蒸发 常压吸收干燥 气流干燥 真空干燥 喷雾干燥 冷冻干燥 三大总结 学习永无止境 学会自学 学而不厌 L/O/G/O 生物制药工艺学复习总结 四大工程技术 微生物发酵制药技术 基因工程制药技术 细胞工程制药技术 酶工程制药技术 微生物发酵制药技术 利用微生物进行药物研究、生产和制剂的综合性技术科学，研究内容包括微生物制药用菌的选育、发酵以及产品的分离和纯化工艺 基因工程制药 指利用酶化学方法，将一种生物的基因与另一种基因载体进行连接构成重组DNA，然后再将重组DNA转入到另外一种宿主之内，使重组DNA随着宿主细胞的增殖而进行表达，产生出药物多肽和蛋白质，最后通过分离和提纯，生产出基因工程药物。 分（离目的基因） 切（割目的基因和载体） 接（连目的基因和载体） 转（化宿主细胞） 筛（选阳性克隆） 表（达目的基因） 基 本 过 程 基因工程制药的基本过程 获得目的基因↓构建重组质粒↓组建基因工程菌或者基因工程细胞↓工程菌培养↓产物分离纯化↓基因工程药物的质量控制 细胞融合 又称体细胞杂交，是指两个或更多个相同或不同细胞通过膜 融合形成单个细胞的过程。 （一）促进细胞融合的方法 1、生物学法 2、化学融合剂法 3、电融合法 单克隆抗体 只针对某一抗原决定簇的抗体分子称为单克隆抗体。 优点： 单特异性和均一性 无限供应 用混合的抗原制备出识别一个抗原决定簇的抗体 McAb PcAb 单克隆抗体技术的核心是用骨髓瘤细胞与经特定抗原免疫刺激的B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能像骨髓瘤细胞那样在体外无限增殖，又具有B淋巴细胞产生特异性抗体的能力。因此，单克隆抗体技术又称为杂交瘤技术。 B淋巴细胞杂交瘤技术的基本原理 B细胞 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 固定化酶 指限制或者固定于特定空间位置的酶，具体来说，就是指经过物理、化学方法处理，使酶变成不易随水流失的固定化催化剂。 固定化酶方法 1、载体结合法 2、交联法 3、包埋法 选择性热变性法只适合固定化细胞 固定化酶的特点 （1）固定化酶属于修饰酶，这种酶可以通过化学、生物、分子工程手段加以改良。 （2）固定化酶的稳定性很高，可以多次连续使用。 （3）反应以后，产物中不含酶，易于纯化。 （4）反应条件易于控制，可实现连续化和自动控制。 （5）酶的利用率高，酶的实际使用量较少。 （6）固定化酶比水溶性酶更适合进行多酶反应。 生物分离的基本过程 生物分离工艺流程： 一般包括原料的选取、预处理、细胞破碎、固-液分离、初步纯化（分离）、精制（高度纯化）和成品加工等过程。 发酵液 （培养液） 胞外产物 预处理 固-液