第四章 紫外可见光谱法.ppt

实际应用中，常用二阶导数光谱 一 阶 二 阶 2.导数光谱的定量分析 若将A?= κ? CL对波长?进行几次求导，式中只有A、 κ是 ?的函数 经n次求导后，吸光度的导数值与吸收物的浓度仍成正比，可进行定量分析——最大的优点是可提高检测灵敏度 本章小结 1.可见分光光度法的定义、朗伯比尔定律、显色反应及条件等。 2.紫外－可见吸收光谱的产生（分子的能级及光谱、有机物及无机物电子能级跃迁的类型和特点） 3.仪器类型、各部件的结构、性能以及仪器的校正 4.应用（定性及结构分析、定量分析的各种方法) * * * * * ②.互变异构体的判断 某些有机化合物在溶液中可能有两种以上的互变异构体处于动态平衡中，这种异构体的互变过程常伴随有双键的移动及共轭体系的变化，因此也产生吸收光谱的变化。最常见的是某些含氧化合物的酮式与烯醇式异构体之间的互变。例如乙酰乙酸乙酯就是和烯醇式两种互变异构体： 它们的吸收特性不同： 酮式异构体：π－π*跃迁：λmax=204nm，εmax小； 烯醇式异构体（双键共轭）：π－π*跃迁：λmax=245nm，εmax=18000。 两种异构体的互变平衡与溶剂有密切关系。在像水这样的极性溶剂中，由于可能与H2O形成氢键而降低能量以达到稳定状态，所以酮式异构体占优势: 而像乙烷这样的非极性溶剂中，由于形成分子内的氢键，且形成共轭体系，使能量降低以达到稳定状态，所以烯醇式异构体比率上升: 三、 定量分析 应用范围：无机化合物，测定主要在可见光区， 大约可测定50多种元素 有机化合物，主要在紫外区 （一）单组分的定量方法 1．吸光系数法 2．标准曲线法 3．对照法：外标一点法 测定条件： 选择合适的分析波长（λmax） A：0.2-0.8 选择适当的参比溶液 1．吸光系数法（绝对法） 例：维生素B12 的水溶液在361nm处的百分吸光系数为207，用1cm比色池测得某维生素B12溶液的吸光度是0.414，求该溶液的浓度 解： 例：精密称取B12样品25.0mg，用水溶液配成100ml。精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于361nm处测定吸光度为0.507，求B12的百分含量？ 解： 例： 解： 2．标准曲线法 示例 芦丁含量测定 0.710mg/25mL 3．对照法：外标一点法 注：当样品溶液与标准品溶液的 稀释倍数相同时 例： 维生素B12的含量测定 精密吸取B12注射液2.50mL，加水稀释至10.00mL；另配制对照液，精密称定对照品25.00mg，加水稀释至1000mL。在361nm处，用1cm吸收池，分别测定吸光度为0.508和0.518，求B12注射液注射液的浓度以及标示量的百分含量（该B12注射液的标示量为100μg / mL） 解： 1）对照法 2）吸光系数法 （二）多组分的定量方法 三种情况： 1．两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 两组分在各自λmax下不重叠→分别按单组分定量 2．两组分吸收光谱部分重叠 λ1→测A1→b组分不干扰→可按单组分定量测Ca λ2→测A2→a组分干扰→不能按单组分定量测Ca 3．两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定 （1）解线性方程组法 （2）等吸收双波长消去法 （3）系数倍率法 (1)．解线性方程组法 步骤： (2)．等吸收双波长法 步骤： 消除a的影响测b 消去b的影响测a 注：须满足两个基本条件 选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点 选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大 (3)．系数倍率法 前提：干扰组分b不成峰形 无等吸收点 步骤：b曲线上任找一点→λ1 另一点→λ2 优点：同时将待测组分和干扰组分放大信号K倍， 提高了待测组分测定灵敏度 a b λ1 λ2 用系数倍率仪将A2b扩大K倍 则有KA2b=A1b 解： 1．取咖啡酸，在165℃干燥至恒重，精密称取10.00mg，加少量 乙醇溶解，转移至200mL容量瓶中，加水至刻度线，取此溶 液5.00mL，置于50mL容量瓶中，加6mol/L的HCL 4mL，加 水至刻度线。取此溶液于1cm比色池中，在323nm处测定吸 光度为0.463，已知该波长处的 ，求咖啡酸百