C反应蛋白检测与临床应用重点.ppt

PCT和CRP在感染性疾病中的临床应用 广东省妇幼保健院检验科 胡 塔 CRP的发现 C-反应蛋白(C-reactive protein)简称CRP, 1930年由Tillet和Francis在急性大叶性肺炎患者血清中发现，因其能与肺炎链球菌C荚膜多糖起沉淀反应而得名，是人类重要的急性期反应蛋白，急性期浓度可升高上千倍。CRP具有多种生物学活性，被认为是最敏感的炎性指标之一。 CRP的结构 CRP是环状五球体蛋白，属于钙结合蛋白，相对分子量约为120000，由五个相同的亚基依靠非共价键构成，在细胞因子IL-6家族诱导下由肝脏上皮细胞迅速合成。 CRP的表达与功能 CRP是人体非特异性免疫机制的一部分。 CRP不能通过胎盘，在体内分布甚广，除血液外、胸水、腹水、心包液及关节液中均可测出。 CRP作为有免疫防御特性的钙结合蛋白, 其最主要生物学功能是在Ca2+存在下与磷酸胆碱、DNA、组蛋白等结合。 CRP能够与体内凋亡坏死的细胞或者外部入侵的细菌、真菌、寄生虫等的细胞壁中的磷酸胆碱结合,从而激活补体,调理吞噬,促使内源性或外源性配体物质的清除。 CRP的参考值 正常值10mg/L 中值约为0.7mg/L 细菌感染时10mg/L 新生儿生出生后3d内测CRP无特异性，因为分娩使CRP应激性升高。 正常人群CRP值 CRP临床应用参考范围 CRP的稳定性 CRP的检测 80年代以前作为炎症和组织损伤的非特异性标志物大量应用于临床。 但是由于过去CRP的检测方法较为落后，假阳性和假阴性很高，影响了它在临床上的价值，而逐渐被临床所忽视。 近年来由于检测技术不断更新，用于检测CRP的快速、简便、可靠的方法已迅速建立。使CRP的临床应用大大增加。其在医学上的价值也真正得到了广泛的承认和认可。 CRP检测方法比较 CRP检测方法简介： CRP检测方法—（1）单向免疫扩散法 优点： 特异性高，重复性好，操作简单，价格低廉，不需要特殊仪器检测等。 缺点： 此法最大的缺点是在抗原过量时易出现假阴性，因此用该方法检测CRP，若未出现沉淀环时，必须稀释标本后复检，以避免漏诊。此外，由于该法的敏感性较差，制约了其临床上的广泛应用。 CRP检测方法—（2）胶乳凝集试验 优点： 简单快速，敏感性、特异性较高 缺点： 易受补体、类风湿因子（RF） 等因素的干扰，产生假阳性结果。因此，为了提高结果的准确性，检测时应对待测标本进行预处理，以去除干扰因素。 CRP检测方法—（3）免疫比浊法 此法是一种抗原抗体结合反应的动态测定法，可快速、准确地测量样品中抗原的含量，并且可在多种自动化检测仪上应用。 目前应用较广泛的Quik-Read 快速CRP定量检测，就是以免疫比浊法为基本原理。 研究显示：免疫比浊法在检测时间、操作方法、结果精确度、重复性、灵敏度方面均优于单扩法与胶乳凝集法。 CRP检测方法—（4）胶乳增强试验 在上述的比浊法中，检测CRP的敏感性方面仍不够理想。这就需要建立更敏感、更精确、在血清CRP浓度较低的情况下（0.1～10mg/L）仍具有较高准确度的检测方法 。 胶乳增强免疫透射比浊法测定超敏CRP(Hs-CRP)是一种新型的检测方法，具有快速、方便、准确等优点 。 利用该方法检测Hs-CRP在预测和预防冠心病、动脉粥样硬化等心血管疾病中起重要作用。 CRP检测方法—（5）免疫标记测定 ELISA、免疫发光法和化学发光法等都可用于CRP的测定。 化学发光法的灵敏度和定量精确度可与RIA媲美,而无同位素污染,试剂稳定,分析速度快。 CRP-POCT(床边试验)法－ ELISA干片法。 把磷脂酰胆碱(PC)化学交联固定于载体。 样品中待检测的CRP与载体的PC结合。 被酶标记的抗CRP单抗结合。 可灵敏、特异性检测CRP,约5分钟可得结果。 CRP的临床应用 （1）CRP用于感染的鉴别 CRP在细菌与病毒感染的患者之间存在明显差异，细菌感染时快速升高。 CRP的持续升高也可发生在慢性炎症，包括自身免疫性疾病以及肿瘤中。 CRP在绝大多数病毒感染的血清浓度变化不大或不变,这是由于大多数病毒感染是在细胞内增殖进行,而完整的细胞膜上缺乏暴露的磷脂蛋白质,故不能触发CRP的产生和结合。 （1）CRP用于感染的鉴别 血清CRP在感染发生后5～8h即开始升高, 48h达到峰值，血浆半衰期19h，高峰值可达正常的数百倍。 随着感染控制它可在24～48h迅速下降, 1w 内恢复正常。 CRP的水平和持续时间与感染程度呈正相关。 CRP持续升高或再度升高提示临床应重视病情的变化。 CRP应用—（2）评估病情 CRP为10～50mg/L表示