北科大微生物放线菌和霉菌的形态结构观察概要.ppt

实 验 二 放线菌和霉菌的形态结构观察 目的要求 学习并掌握放线菌、霉菌形态结构的观察方法和制片方法。 观察放线菌、霉菌的菌落特征、个体形态及其繁殖方式。 观察霉菌个体形态及各种无性孢子及有性孢子的形态 放线菌的菌丝形态 单轮 (有螺旋) 双轮 (无螺旋) 双轮 (有螺旋) 单轮 (无螺旋) 垂直 弯曲 丛生 紧螺旋 松环， 初级螺旋， 钩状 松螺旋 链霉菌孢子丝形态 实验材料 (一)菌种 灰色链霉菌。 黄曲霉、黑根霉 。 (二)其他物品 0.1％美蓝染液、乳酸石炭酸溶液、载片及盖片、显微镜、接种环、接种针、酒精灯、蒸馏水等。 实验内容（放线菌） (一)菌落形态的观察 观察放线菌菌落表面形状、大小、颜色、边缘，以及有无色素分泌到培养基内等； 并用接种环挑取菌落，注意菌丝在培养基上着生的紧密情况。 区别基内菌丝、气生菌丝及孢子丝的着生部位。 实验内容 (二)个体形态特征的观察 观察放线菌菌丝和孢子丝自然生长的性状，其中包括气生菌丝（较粗），基内菌丝（较细）和孢子丝的形状。 注意放线菌菌丝直径的大小，孢子丝的形状。哪种菌的孢子丝呈螺旋状？ 实验内容 (三)孢子形状的观察（印片染色法） 用盖片印片 载片上滴加0.1％美蓝染液 盖片印片一面朝下盖在载片上 镜检 高倍镜(400×)下观察灰色链霉菌和淡紫灰链霉菌的孢子及孢子丝。 实验内容 (四)插片法观察放线菌形态特征 插片染色法：28℃插片培养4—6d，轻轻取出盖玻片，载片上滴加0.1％美蓝染液，盖片有菌一面朝下盖在载片上，镜检。 观察淡紫灰链霉菌基内菌丝、气生菌丝及孢子丝的卷曲状况，及分生孢子的形状。 实验内容（霉菌） (一)霉菌菌落特征的观察 观察产黄青霉、黄曲霉、黑根霉平板中的菌落，描述其菌落特征。 注意菌落形态的大小，菌丝的高矮，生长密度，孢子颜色和菌落表面等状况。 将霉菌菌落与细菌、放线菌、酵母菌菌落进行比较。 实验内容 (二)制片观察 于洁净的载片中央，滴加一小滴乳酸石炭酸（水）溶液，然后用接种钩从菌落边缘挑取少许菌丝体置于其中，使其摊开，轻轻盖上盖片(注意勿出现气泡)，置于低倍镜、中倍镜、高倍镜下观察。 实验内容 1．产黄青霉 观察菌丝体的分枝状况，有无横隔。分生孢子梗及其分枝方式、小梗及分生孢子的形状。 利用平板插片法，可观察到较为清晰的分生孢子穗，帚状分枝的层次状况及成串的分生孢子。 实验内容 2．黄曲霉 观察菌丝体有无横隔、足细胞，注意分生孢子梗、顶囊、小梗及分生孢子着生状况及形状。 实验内容 3．黑根霉 观察无隔菌丝、假根、匍匐枝、孢子囊梗、孢子囊及孢囊孢子。孢子囊破裂后能观察到囊托及囊轴。 观察黑根霉接合孢子。 图2-100为根霉属的接合孢子 接合孢子（zygospore）是由菌丝生出形态相同或略有不同的配子囊接合而成的。两条相邻的菌丝相遇，各自向对方产生出极短的侧枝，称为原配子囊。原配子囊接触后，顶端各自膨大并形成横隔，分隔成一个称为配子囊的细胞。配子囊下面的部分称为子囊柄。相接触的两个配子囊之间的横隔消失，其细胞质与核互相配合，同时外部形成厚壁，此即接合孢子。图2-99是毛霉属的接合孢子的形成过程。图2-100为根霉属的接合孢子的照片。 黑根霉的有性繁殖需要有两个生理上不同而有亲和力的“＋”及“-”的菌丝体，即异宗接合，当两个相反的宗系彼此接触时，就产生称为原配子囊的接合枝。大量的原生质和很多的细胞核流到正在开始膨大的这些器官互相接触的顶部去，接着在靠近原配子囊顶端的地方各自形成一个分隔，把它分为两个细胞，即一个顶生配子囊和一个配囊柄细胞。两个互相接触的配子囊的壁在接触处消解，两者的原生质相混合，细胞核成双配对，一个为“＋”，一个为“-”。每对细胞核的两个核结合而成二倍体的细胞核，没有结合的细胞核可能就消解掉了。此时两个配子囊接合所形成的新细胞膨大了许多，壁渐变厚，表面变黑和成瘤状，这个厚壁的结构就是接合孢子。在经过一段休眠期后，接合孢子在发芽过程中进行减数分裂，长出孢囊梗。其顶端再发展即成孢子囊，叫做“接合孢子囊”。其形成的孢子囊孢子具有两种接合型，这有别于无性循环中一个孢子囊只产生一种类型的孢子。 实验报告内容(一)描述你所观察到的放线菌菌落特征。 微生物名称 大小 表面形状 含水程度 菌落颜色 透明度 与培养基 结合程度 嗅味 灰色 链霉菌 正面： 反面： (二)记录并绘制灰色链霉菌个体形态及生殖方式图，标明气生菌丝、孢子丝及孢子的形态。 微生物名称 制片法 个体形态及生殖方式图 灰色 链霉菌 印片法或 直接观察法 (三)描述产黄青霉、黄曲霉、黑根霉的菌落的颜色及特征 微生物 名称 大小 表面 形状 菌丝 颜色 孢子 颜色 菌丝 高矮 生长 密度 与培养基 结合程度 嗅味 黑