专题5DNA和蛋白质技术课题3血红蛋白的提取和分离(二)课题.ppt

二、实验操作 血液 血浆 水 分 固体物质： 血浆蛋白、无机盐、磷脂、葡萄糖等 血细 胞 白细胞 血小板 红细胞 （最多） 血红蛋白 （90％） （一）血红蛋白 血红蛋白 两个α－肽链 两个β一肽链 四个亚铁血红素基团 每个肽链环绕一个亚铁血红素基团，此基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳，血红蛋白因含有血红素而呈红色。 （一）血红蛋白 二、实验操作 用鸡的红细胞提取DNA，用猪、牛、羊的红细胞提取血红蛋白的原因是什么？ 鸡的红细胞具有细胞核，含有DNA，便于进行DNA的提取；人的红细胞无细胞核，结构简单，血红蛋白含量丰富，便于提取血红蛋白。 样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定 蛋白质提取和分离步骤 （二）操作过程 (1)红细胞的洗涤: ②洗涤目的: 去除杂蛋白，以利于后续血红蛋白的 分离纯化。 ①洗涤操作： 1、采集血样。 2、低速短时间离心。 3、吸取血浆：上层透明的黄色血浆。 4、盐水洗涤：用五倍体积的质量分数为0.9％的氯化钠溶液洗涤。 5、低速短时间离心。 6、重复4、5步骤三次，直至上清液中已没有黄色，表明洗涤干净。 1.样品处理 （二）操作过程 洗涤次数过少，无法除去血浆蛋白； 离心速度过高、时间过长会使白细胞和淋巴细胞等一同沉淀，达不到分离的效果。 注意： (2)血红蛋白的释放：加蒸馏水到原血液体积，再加4