第八章微生物遗传教程.pptx

第八章微生物遗传;;;;二.RNA作为遗传物质;一.质粒;1.质粒的分子结构;2.质粒的分离;;3.质粒的特性;质粒的不亲和性（plasmid incompatibility），;4.质粒的主要类型;(1) 致育因子(Fertility factor，F因子);(2)抗性因子（Resistance factor，R因子）;(3)Col 质粒：产细菌素的质粒（Bacteriocin production plasmid）;细菌素种类很多,一般根据产生菌的种类进行命名：;(4) 毒性质粒（virulence plasmid）;(5) 代谢质粒（Metabolic plasmid）;根据拷贝数或复制特点，质粒可分为：;二.转座因子;（一）转座因子的种类1.插入序列（insertion sequence）;2.转座子;（二）转座因子的遗传学效应;一.诱发突变; 已知的化学致变剂和物理致变剂 物理致变剂 致变剂 电离辐射、紫外辐射等 化学致变剂 脱氨剂、烷化剂、 大型加合物供体、碱基类似物、 插入剂、交联剂。;诱变剂导致表型改变——营养缺陷型;二.诱变剂与致癌物——Ames试验;埃姆斯实验;实验步骤;;诱变育种：是用物理或化学的诱变剂使诱变对象内的遗传物质（DNA）的分子结构发生改变，引起性状变异并通过筛选获得符合要求的变异菌株的一种育种方法。诱变育种的实践意义：当前发酵工业和其他微生物生产部门所使用的高产菌株，几乎毫无例外地都是通过诱变育种而明显提高其生产性能的。 ;1.选择选择合适的出发菌株 2.制备待处理的菌悬液 3.诱变处理 4.筛选 5.保藏和扩大试验;出发菌株———用来育种处理的起始菌株出发菌株应具备： ①对诱变剂的敏感性高；  ②具有特定生产性状的能力或潜力； 出发菌株的来源； ①自然界直接分离到的野生型菌株： ②历经生产考验的菌株： ③已经历多次育种处理的菌株。;要求：①菌体处于对数生长期②细胞分散且为单细胞方法：①玻璃珠打散10-15min; ②加０.3%吐温80（表面活性剂） ③用无菌脱脂棉过滤。 制备：  物理诱变剂——生理盐水（0.85%NaCl)  化学诱变剂——缓冲液 浓度： 细菌、放线菌 108个/ml ，霉菌、酵母菌 106个/ml;;选择诱变剂的种类： 在同样效果下，应选用最方便的因素；在同样方便的情况下，则应选择最高效的因素。在物理诱变剂中，尤以紫外线为最方便，在化学诱变剂中，一般可选用诱变效果最为显著的“超诱变剂”，如NTG。。 一种较有效的简易处理方法的大致操作步骤是：先在平板上涂上出发菌株细胞，然后在平板上均匀地放上几颗很小的诱变剂颗粒（也可放吸有诱变剂溶液的滤纸片），经培养后，在制菌圈的边缘挑取若干突变菌落，分别制成悬浮液，然后将其涂在一般平板表面使长出许多单菌落，最后可用影印培养法或逐个检出法选出突变种。;（1）筛选方案： 初筛：删去明确不符合要求的大部分菌株，把生产性状类似的菌株尽量保留下来，使优良性状的菌株不至于漏网；——因此，初筛工作以量为主，测定的精确性还在其次；初筛手段应尽可能快速、简单。 复筛：确认符合要求的菌株；——复筛以质为主，应精确测定每个菌株的生产指标。;①温度敏感突变株 筛选方法：影印法 用途：常用于提高代谢物产量 原因：是由于某一酶蛋白结构改变后，在高温下活力丧失;;②抗药性突变株的筛选; ③营养缺陷型的筛选;适用于：丝状（放线菌、霉菌） 原理：野生型在基本培养基上发育成菌丝；缺陷型孢子可通??滤膜，野生型菌丝不能通过。;①逐个检出法; ;生长谱法 方法简便； 回变和污染不影响 结果 测定物质可为粉末 或纸片;作为菌株的遗传标记：进行基因工程、诱变育种； 研究代谢过程时用作亲本标记； 作为生产菌种：aa、核苷酸等生产菌种； 作为aa、维生素、碱基的测定菌株。;总结