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真核生物基因表达调控分析
(2) 复杂转录单位 ? 含有复杂转录单位的主要是一些编码组织和发育特异性蛋白质的基因,它们除了含有数量不等的内含子以外,其初级转录产物能通过多种不同方式加工成两个或两个以上的mRNA。 3.翻译水平的调控 (1)mRNA的“扫描模式”与合成起始 AUG的前(5‘)和后(3’)序列大多数为A/GNNAUGG,决定了起始复合物形成。通过“融合基因”方式产生多聚顺反子替代物,补偿真核生物核糖体不能利用多聚顺反子型mRNA来协调各种不同蛋白质合成的缺陷。 (2) mRNA5’帽子结构的识别与合成 细胞中的帽子化酶同时具有RNA三磷酸酯酶和鸟苷酸转移酶活性,通过鸟苷酸转移酶生成5-5‘磷酸二酯键,从而形成加帽反应。 (3)mRNA稳定性控制 ? 真核生物能否长时间、及时地利用成熟的mRNA分子翻译出蛋白质以供生长、发育的需要,是和mRNA的稳定性以及屏蔽状态的解除相关的。 ? 原核生物mRNA的半衰期很短,平均大约3min。高等真核生物迅速生长的细胞中mRNA的半衰期平均3h。在高度分化的终端细胞中许多mRNA极其稳定,有的寿命长达数天。 转运铁蛋白受体(TfR)和铁蛋白负责铁吸收和铁解毒。这两个mRNA上存在相似的顺式作用元件,称为铁应答元件(iron response element,IRE)。IRE与IRE结合蛋白(IREBP)相互作用控制了这两个mRNA的翻译效率。当细胞缺铁时,IREBP与IRE具有高亲和力,两者的结合有效地阻止了铁蛋白mRNA的翻译,与此同时,TfR mRNA上3非翻译区中的IRE也与IREBP特异结合,有效地阻止了TfR mRNA的降解,促进TfR蛋白的合成。 (4) 蛋白质因子的修饰与翻译起始调控 ? 用兔网织红细胞粗抽提液研究蛋白质合成时发现,如果不向这一体系中添加氯高铁血红素,网织红细胞粗抽提液中的蛋白质合成抑制剂就被活化,蛋白质合成活性在几分钟之内急剧下降,很快就彻底消失。现已查明,网织红细胞蛋白质合成的抑制剂HCI是受氯高铁血红素调节的eIF-2的激酶,可以使该因子的α-亚基磷酸化并由活性型转变为非活性型。 返回首页 第六、七章复习思考题 1.什么是基因表达?试述基因表达变化的特点及其调控对生物体的重要性。 2.为什么说转录起始的调控是基因表达调控的中心环节? 3.举实际例子说明操纵元的组成元件及其作用,并分析可阻遏的操纵元和可诱导的操纵元的调控方式。 4.比较真核和原核生物的基因表达和基因表达调控相似和不同之处,说明真核基因调控的复杂性表现在哪些方面? 5.简述操纵子、启动子、转录因子、弱化子、增强子、前导肽、 CAP、锌指的概念、结构、及功能。 6、真核生物的顺式作用元件和反式作用因子各包括哪些?它们通过什么方式调控基因表达? 谢谢大家听课! 真核生物有3类RNA聚合酶,负责转录3类不同的启动子: 由RNA聚合酶I负责转录的rRNA基因,启动子(I类)比较单一,由转录起始位点附近的两部分序列构成。第一部分是核心启动子,由-45—+20位核苷酸组成,单独存在时就足以起始转录。另一部分由-170—-107位序列组成,称为上游调控元件,能有效地增强转录效率。 2、RNA聚合酶 由RNA聚合酶Ⅲ负责转录的是5SrRNA、tRNA和某些核内小分子RNA(snRNA),其启动子(Ⅲ类)组成较复杂,又可被分为三个亚类。两类5S rRNA和tRNA基因的启动子是内部启动子,位于转录起始位点的下游,都由两部分组成。第三类启动子由三个部分组成,位于转录起始位点上游。 由RNA聚合酶II负责转录的II类基因包括所有蛋白质编码基因和部分snRNA基因,后者的启动子结构与III类基因启动子中的第三种类型相似,编码蛋白质的II类基因启动子在结构上有共同的保守序列。转录起始位点没有广泛的序列同源性,但第一个碱基为腺嘌呤,而两侧是嘧啶碱基。这个区域被称为起始子,序列可表示为Py2CAPy5。Inr元件位于-3—+5。仅由Inr元件组成的启动子是具有可被RNA聚合酶II识别的最简单启动子形式。 也有一些II类启动子不含有TATA盒,这样的启动子称为无TATA盒启动子。 多数II类启动子有一个被称为TATA盒的共有序列,通常处于-30区,相对于转录起始位点的位置比较固定。TATA盒存在于所有真核生物中,TATA盒是一个保守的七碱基对,其序列为: ? 原核基因启动区范围较小,而真核基因启动区范围较大。 TATA区主要作用是使转录精确地起始。 CAAT区和GC区主要控制转录起始频率。 不是每个基因的启动子区都包含三种序列,真核细胞中存在大量特异性或组成性表达的、能与不同基因启动子区结合的转录调控因子。 3、增强子及其对转录的影响 是一种能够提高转录效率的
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