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(1)人工合成目的基因的途径有哪两条? ①将从细胞中提取分离出来的基因作为模板,转录成mRNA,再经逆转录成单链DNA,按互补原则合成双链DNA;②根据蛋白质中氨基酸序列推测出mRNA中碱基序列,然后再推出DNA的碱基序列,最后通过化学方法合成目的基因。 (2)如何将目的基因和质粒结合成重组质粒(重组DNA分子)? ①用一定的限制酶切割质粒,使其出现一个有黏性末端的切口;②用同种限制酶切割目的基因,产生相同的黏性末端;③将切割下来的目的基因片段插入到质粒的切口处,再加入适当的DNA连接酶,使质粒与目的基因结合成重组质粒。 (3)目前把重组质粒导入细菌细胞时,效率还不高,导入完成后得到的细菌,实际上有的根本没有导入质粒,有的导入的是普通质粒A,只有少数导入的是重组质粒。以下步骤可鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒:将得到的细菌涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上,能够生长的就导入了质粒A或重组质粒;反之就没有。用这种方法鉴别的原因是_________________________ __________________________。 普通质粒A和重组质粒都 含有抗氨苄青霉素基因 (4)若把通过鉴定证明导入了普通质粒A或重组质粒的细菌放在含有四环素的培养基上培养,会发生的现象是____________________________,原因是: 有的能生长,有的不能生长 导入普通质粒A的细菌能生长,因为普通质粒A上有抗四环素基因;导入重组质粒的细菌不能生长,因为目的基因插在抗四环素基因中,抗四环素基因的结构被破坏。 (5)导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是 是受体细胞通过转录、翻译合成相应的蛋白质即人的生长激素。 杂交育种与诱变育种基因工程及其应用 第六单元 从杂交育种到基因工程 一、杂交育种 将两个或多个品种的优良性状通过交配集中在一起,再经过选择和培育,获得新品种的方法,称 思考与讨论Ⅰ 从杂交育种的过程来看,杂交育种的缺陷是什么?可用什么方法来加以克服? 不足之处是新类型的个体中还含有一定比例的杂合子,需用其不断地进行自交、选择,所需时间很长。可用单倍体育种的方法加以克服。 P AABB aabb × F1 AaBb AB、Ab、aB、ab 配子 花药离 体培养 可得到基因型为AB、Ab、aB、ab这四种单倍体植株 人工诱导 染色体加倍 就可得到基因型为AAbb这种纯合子的二倍体植株 思考与讨论Ⅱ 杂交育种的原理是什么?能否有新的基因和新的性状产生?如果培育出新的性状,应该采用什么育种方法? 杂交育种的原理是基因重组,产生新的基因型,使性状重新组合,而不能产生新的基因和新的性状。 如果要培育出新的性状,可采用一定的措施来诱导基因突变,培育新的品种。 二、诱变育种 利用物理因素(x射线、γ射线、紫外线、激光等)或化学因素(如亚硝酸、硫酸二乙酯等)来处理生物,使生物发生基因突变。 诱变育种可以提高突变频率,在较短的时间内获得更多的优良变异类型。 如“黑农5号”的大豆(产量提高16%,含油量增加2.5%);青霉菌的代谢产物——青霉素(20单位提高到50000~60000单位/ml) 类型 杂交育种 人工诱变育种 单倍体育种 多倍体育种 原理 常用方法 优点 缺点 实例 将具有不同 优良性状的 两亲本杂交 用物理或化学 的方法处理萌发的种子或幼苗 花药离体培养;诱导染色体加倍 用秋水仙素 处理萌发的 种子或幼苗 使位于不同个体的优良性状集中于一个个体上 提高变异频率加速育种进程 明显缩短 育种年限 器官大型, 营养含量高 育种时间长 有利变异少需大量处理供试材料 技术复杂,需与杂交育种和多倍体育种配合 只适用于植物 基因突变 染色体组 成倍减少 染色体组 成倍增加 基因重组 培育矮抗小麦 培育青霉 素高产菌株 三倍体无子 西瓜的培育 培育矮抗小麦 几种主要育种方法的比较 杂交育种方法的不足: 杂交育种只能利用已有基因的重组,按需选择,并不能创造新的基因。杂交后代会出现性状分离现象,育种进程缓缦,过程繁琐。这些都是杂交育种方法的不足。 诱变育种的优点: 诱变育种的优点是能够提高突变率,在较短的时间内获得更多的优良变异类型。诱变育种的局限性是诱发突变的方向难以掌握,突变体难以集中多个理想性状。要想克服这些局限性,可以扩大诱变后代的群体,增加选择的机会。 三、基因工程的原理 基因工程是指按照人们的意愿,
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