C5凝集反应课程.ppt

目的要求 本章内容 二、凝集反应的特点： 4. IgM的作用比IgG大数百倍 5. IgG与抗原结合后，常不出现凝集反应，称不完全抗体 三、凝集反应的分类 Sectiong 1 直接凝集反应（direct agglutination） 原理： 一、玻片凝集试验（定性）： 二、试管凝集试验 Sectiong 2 间接(或被动)凝集反应(indirect /passive agglutination) 一、载体的种类及处理方法 （一）载体的种类 （二）载体的处理 间接凝集试验类型 1.正向间接凝集试验 2. 反向间接凝集试验 3.间接凝集抑制试验 4.协同凝集试验 协同凝集试验 三、间接血凝试验（hemagglutination test） 四、胶乳凝集试验 （latex agglutination test） 五、各型凝集反应比较 六、间接凝集反应的应用 * 第四章 凝集反应 (agglutination reaction) 徐文锦 临床免疫学 检验教研室 掌握 各类凝集反应的 基本原理及临床应用 熟悉 凝集反应的基本概念、 特点和类型 了解 凝集素、凝集原、SPA的概念 第一节 直接凝集反应 1 第二节 间接凝集反应 2 第三节 抗球蛋白试验 3 概述 一、基本概念： 细菌、红细胞等颗粒性抗原或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒后，与相应抗体（或抗原）在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象，称为凝集反应(agglutination)。反应中的抗原称为凝集原（agglutinogen），抗体称为凝集素（agglutinin）。 颗粒性抗原 ＋ 相应抗体 凝集块　　 （或抗原） （或致敏颗粒） （肉眼可见） 电解质 凝集原 凝集素 1.过程：两个阶段 抗原抗体特异性结合 可见凝集现象 2. 结果判断：以定性试验为主（阴性或阳性），或可半 定量 ［效价或滴度（titer）］。 3. 灵敏度：高于沉淀反应。 正向间接凝集 反向间接凝集 间接凝集抑制试验 协同凝集试验 直接凝集反应 间接凝集反应 玻片凝集 试管凝集 间接凝集 间接血凝 胶乳凝集试验 明胶凝集试验 特殊凝集反应 自身红细胞凝集试验 抗球蛋白试验 电解质 颗粒性抗原 ＋ 相应抗体 凝集块（肉眼可见） 方法：玻片法、试管法、微量血凝反应板法 肉眼或显微镜观察，凝集者为阳性， 用于细菌鉴定、血清学分型、血型鉴定等。 Ab+Ag c 可半定量，以效价报结果，即以产生明显凝集现象的最高血清稀释度为该Ab的效价。 颗粒性抗原 + 一系列稀释血清 凝集 用途： 肥达试验（Widal test）——伤寒、副伤寒的辅助诊断。 外斐试验（Weil-felix test）——斑疹伤寒、恙虫病的辅助诊断。 交叉配血试验等。 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024 Pos. Neg. Titer 64 8 512 2 32 128 32 4 Patient 1 2 3 4 5 6 7 8 间接血凝试验 试管凝集试验 可溶性抗原（或抗体）——载体 （ 致 敏 颗 粒） 吸附 ＋ 相应抗体（或抗原） 可见凝集块 原理 电解质 红细胞处理 醛化（甲醛、戊二醛、丙酮醛）——RBC不易溶血 鞣酸处理—— 增强RBC吸附蛋白质的能力 正向间接凝集反应 间接凝集抑制试验 反向间接凝集反应 协同凝集反应 二、间接凝集试验类型 载体 Ag 查 Ab 抗原致敏颗粒 载体 凝集（+） 载体 载体 载体 载体 1 载体 Ag 变性IgG Ab RF 载体 Ab 查 Ag 抗体致敏颗粒 载体 Ab 凝集(+) ?Ag 载体 载体 载体 载体 载体 （抗—AFP） （AFP） 载体 Ag Ag Ab 查 A + Ab ?Ag Ag--Ab 抗原致敏颗粒 不凝集（+） B Ab Ag--Ab 无Ag 游离抗体 抗原致敏颗粒 凝集（—） 间接凝集抑制试验 反向间接凝集抑制试验 载体 查 Ab + Ag） （Ab Ab 查 Ag 金葡菌 SPA 抗体致敏金葡菌 ？Ag 凝集（+） 脑膜炎球菌 流脑抗体 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024 Pos. Neg. Titer 64