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- 2017-05-12 发布于湖北
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细菌鉴定流程详细分析
细菌鉴定流程
细菌鉴定
细菌形态学鉴定 16S rDNA 鉴定 生理生化鉴定
细菌形态学鉴定
从-80??冰箱中取出菌株放4??复苏,轻柔混匀后用接种环接一环菌液在培养基平板上划线活化,根据菌株来源选择适宜的培养基。
放入培养箱倒置培养,实验室一般采用28??培养,特殊菌株依据该菌最适条件(时间、温度)培养24-48h。
3. 纯化:从活化培养基平板上挑取单菌落继续划板培养。
4. 观察记录菌落形态特征:大小(mm)、形状、干湿、透明度、颜色、边缘整齐还是,,,,,,,
细菌 大小(mm)形状 干湿 透明度颜色 边缘
注意事项:
接种划线应在酒精灯旁边操作
培养时应倒置培养,防止污染
二、革兰氏染色
涂片固定
将纯化后的菌株进行革兰氏染色,滴一滴生理盐水于载玻片上,无菌条件下用接种环挑取少量???落均匀涂布水滴中,使其自然干燥,菌面向上,经火焰固定。
注意事项:菌液涂片时不可过于浓厚,干燥、固定。固定时通过火焰1~2次即可,不可过热,以载玻片不烫手为宜。
染色
一般包括初染、没染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:
加上结晶紫后,染色1分钟,水洗。
加上碘液染色1分钟,水洗。
加上95%酒精,摇动玻片,根据涂片厚度,脱色约20~60秒,水洗,吸去水分。
加上蕃红后,染色1分钟,水洗。
吸干或在空气中晾干后,油镜镜检。
结果
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