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- 2017-05-12 发布于湖北
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(动物来源)碱性磷酸酶的提取及性质研究 主要内容 课题研究现状 研究方案 实验器材及试剂配置方法 课题研究现状 碱性磷酸酶(简称ALP或AKP) 是一种底物专一性较低的磷酸单酯酶,广泛存在于植物、动物和微生物体内,是一种重要的调控酶,在生物体内直接参与了磷酸基团的转移和代谢过程。 目前,国内外学者对 ALP 进行了广泛的研究,包括不同物种 ALP 的结构、催化反应机理、理化性质、分离纯化、功能基团、检测方法等。 课题研究现状 迄今为止,有大量关于碱性磷酸酶的报道,在1911年Levene等、1912年Grosser等就已经分离到(碱性)憐酸酯酶;直到1934年,Davis正式提出了碱性磷酸酶这一命名;1958年,Agren等运用同位素标记的方法分离到磷酸丝氨酸;近些年以来,很多研究者从不同动物组织中分离纯化出了碱性憐酸酶,并对其部分性质做了大量的研究。 研究方案 1.碱性磷酸酶的分离纯化 2.分子量测定(SDS—PAGE)原理 3.Km和Vmax值测定 4.酶的固定化 5.酶动力学研究 初步纯化原理 采取有机溶剂沉淀法从猪肝匀浆液中提取、分离碱性磷酸酶(AKP)。正丁醇能使部分杂蛋白变性,过滤除去杂蛋白即为含有
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