第五章细菌检验技术汇总.pptVIP

【操作】 1.分区划线分离法（用于细菌标本的分离纯化。） 五段分区法 孵育后情况 单菌落（clone) 菌苔(lawn) 二、染色细菌标本检查法 －－染料 细菌染色用的染料 酸性染料（阴离子染料）：染色离子带阴电荷，能与带阳电的物质结合，使之着色。降低菌液的pH而使细菌带阳电时，就可用酸性染料染色。（伊红、刚果红） 碱性染料（阳离子染料）：与带负电的物质结合，细菌一般带负电，所以细菌染色所用的染料，常用碱性染料（碱性复红、美蓝）。 复合染料：碱性染料与酸性染料的结合物（伊红美蓝、伊红天青）。 单纯染料：不能与被染物生成盐类 影响染色的因素 细菌的结构：细胞壁的结构、细胞膜的通透性、膜孔的大小 培养基：组成、菌龄、pH 染色细菌标本检查法 －－制片方法 制片：（制片是染色的关键，如不注意菌体涂布的均匀度，会造成染料的大面积堆积，而使观察结果不理想） 制片：在干净的载波片（平时放在95%酒精中)上滴一滴蒸馏水或无菌水，用接种工具进行无菌操作，挑取培养物少许，置载玻片的水滴中与水混合做成悬液，并涂成直径约1cm的薄层。若材料为液体培养物或自固体培养物中洗下制备的菌液，则可直接涂布于载玻片上。涂布要均匀，菌体间少重叠。 干燥：涂布最好在室温下使其干燥，有时为之使之干燥得快些，小心地在酒精灯火焰高处微微加热。