冻干管开启规程分析.docVIP

冻干管的开启及制作规程 一、培养基的配制要求： 1. 按照菌种库相应要求配置培养基，6支液体试管（5ml/支），三角瓶4个（30-50ml/瓶），斜面5支。 2. 所有培养基配制完成后，放置于相应的培养温度和37℃无菌检查48h。 注意： 有很多无机盐的培养基要将能够产生沉淀的盐分开溶解（各自用10ml去离子水溶解后，再加入到主培养基中） 二、超净工作台的准备 1. 将新洁尔灭原液稀释50倍，喷到台面上，或者纱布浸湿后擦拭台面，或者用75%的乙醇擦拭或者喷洒（注意不要开火）。 2. 开紫外灯照射20-30min。 3. 关闭紫外灯，开启风机，10分钟以上。 4. 在开始接种前，用75%酒精棉擦拭台面，手、枪。 5. 可以在台面上铺一块灭菌的纱布。 三、冻干管的开启 1. 冻干管的开启：一般有滴水法和砂轮打磨法。从DSMZ买来的双层菌种管需要用滴水方法，从国内的有些库购买的，或NRRL得到的菌种管很细，滴水法很难打开，因此，需要用砂轮打磨。 滴水法：用酒精棉擦拭菌种管，尖头稍倾斜向下（以防菌种滚落到前面烫的区域致死，重要！），用酒精灯的外焰烧烤菌种管的前端，约1min后，用无菌水快速滴加到菌种管上，此时，管上会有裂缝，继续靠火操作，用无菌镊子轻敲破碎处，将菌种管打开。 砂轮打磨法：用玻璃砂轮在菌种管的一侧反复打磨，出现痕迹。接着，将该处在火上灼烧灭菌。将一张