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- 2017-05-11 发布于安徽
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基因表达谱芯片数据的分析其Bioconductor实现.doc
基因表达谱芯片数据分析及其Bioconductor实现
表达谱芯片及其应用
表达谱DNA芯片(DNA microarrays for gene expression profiles)是指将大量DNA片段或寡核苷酸固定在玻璃、硅、塑料等硬质载体上制备成基因芯片,待测样品中的mRNA被提取后,通过逆转录获得cDNA,并在此过程中标记荧光,然后与包含上千个基因的DNA芯片进行杂交反应30min~20h后,将芯片上未发生结合反应的片段洗去,再对玻片进行激光共聚焦扫描,测定芯片上个点的荧光强度,从而推算出待测样品中各种基因的表达水平。用于研究基因表达的芯片可以有两种:① cDNA芯片;② 寡核苷酸芯片。
cDNA芯片技术及载有较长片段的寡核苷酸芯片采用双色荧光系统:目前常用 Cy3一dUTP(绿色)标记对照组mRNA,Cy5一dUTP(红色)标记样品组 mRNA[1]。用不同波长的荧光扫描芯片,将扫描所得每一点荧光信号值自动输入计算机并进行信息处理,给出每个点在不同波长下的荧光强度值及其比值(ratio值),同时计算机还给出直观的显色图。在样品中呈高表达的基因其杂交点呈红色,相反,在对照组中高表达的基因其杂交点呈绿色,在两组中表达水平相当的显黄色,这些信号就代表了样品中基因的转录表达情况[2]。
基因芯片因具有高效率,高通量、高精度以及能平行对照研究等特点,被迅速应用于动、植物和
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