酶与蛋白质工程第1章蛋白质与蛋白质工程总结.pptVIP

第一讲 蛋白质与蛋白质工程 氨基酸的基本结构和构型 存在于自然界的氨基酸有300种。动物机体的蛋白质经强酸水解之后可以得到20种氨基酸，并且均为L-氨基酸（除了甘氨酸），含不对称的α-碳原子。它们之间的差别在于有不同的侧链基团 R 等电点 isoelectric point, pI 在某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性，在电场中既不向阳极也不向阴极移动。此时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点 氨基酸在等电点时的特点： 1. 净电荷数等于零，在电场中不移动； 2. 此时氨基酸的溶解度最小 肽平面/酰胺平面 肽平面 蛋白质顺序测 定基本战略 一级结构测定的基本流程: 1 拆分蛋白质分子的多肽链; 2 鉴定多肽链的N一末端和C一末端残基; 3 用两种或几种不同的断裂方法将多肽链裂解成较 小的片段; 4 测定各肽段的氨基酸序列; 5 重建完整多肽链的一级结构; 6 确定半胱氨酸残基间形成的二硫键的位置 N-末端和C-末端氨基酸残基的确定— 为氨基酸序列排列建立两个重要的参考点 N端分析方法： C末端分析方法 多肽链部分裂解成较小的片段—化大为小，获得短肽段 酶解法: 胰蛋白酶，糜蛋白酶，胃蛋白酶，嗜热菌蛋白酶等 胰蛋白酶： R1 赖氨酸Lys和精氨酸Arg侧链 专一性较强，水解速度快 R1 苯丙氨酸Phe,